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临床检验知识点

发布时间:2021-03-02 10:15:11 浏览数:

微生物 1. 原核细胞型微生物:仅有原始核,无核膜、无核仁,染色体仅为单个裸露DNA分子,无有丝分裂,缺乏完整的细胞器。属于这类微生物的有细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体。

2. 真核细胞型微生物细胞核分化程度较高,有典型的核结构(有核膜、核仁、多个染色体,由DNA和组蛋白组成),通过有丝分裂进行繁殖。胞浆内有多种完整的细胞器。属于这类微生物的有真菌和原虫。

3. 非细胞型微生物结构最简单,体积最微小,能通过细菌滤器,无细胞结构,由单一核酸(DNA或RNA)和(或)蛋白质外壳组成,无产生能量的酶系统。必须寄生在活的易感细胞内生长繁殖。这类微生物有病毒、亚病毒和肮粒。

4. 微生物是存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、肉眼不能直接看到,必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百至数万倍才能看到的微小生物。微生物包括病毒、细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、放线菌、真菌和原虫等。

5. 细菌形体微小,通常以微米为测量单位。

6. 条件致病性微生物(正常菌群)——临床上多引起内源性感染。

7. G+菌特有成分:磷壁酸(重要表面抗原,可用于细菌血清学分型)(外毒素)。

G-菌特有成分:外膜层(由脂多糖(内毒素)、脂质双层(磷脂)、脂蛋白)。

8. G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥(G-菌无。是溶菌酶、青霉素作用部位)。

9. 细菌的主要遗传物质:核质(染色体)、质粒(存在于胞质,双链闭合环状DNA分子)、转位因子 10. 细菌外毒素的化学本质是蛋白质。不耐热,易被热破坏,56℃20分钟即可破坏,性质不稳定,易被酸和酶破坏,经0.3%到0.4%的甲醛液处理后失去毒性但仍保留免疫原性的生物制品称为类毒素。

11. 内毒素是革兰阴性细菌壁中的脂多糖成分(LPS),由O特异性多糖,非特异性核心多糖和脂质A3。其中脂质A是内毒素的主要毒性组分。

12. 荚膜本身无毒,但能抵抗吞噬细胞的吞噬和消化作用,增强细菌的侵袭力,是病原菌的重要毒力因子。

13. 芽孢是有革兰阳性菌形成的,无致病性,是细菌的休眠体,而非细菌的繁殖方式。特有的吡啶二羧酸成分,具有保护和稳定蛋白质等生命物质的作用。

将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标。

14. L型革兰阳性菌细胞壁几乎完全缺失,原生质仅被一层胞膜包绕,一般呈球形,称原生质体,菌落:①“油煎蛋”(荷包蛋)样菌落(典型L型细菌)。②颗粒型菌落(简称G型菌落)③丝状菌落(简称F型菌落)。

15. 细菌个体的生长繁殖:细菌一般是以二分裂方式进行无性繁殖,个别细菌如结核分枝杆菌可以通过分枝方式繁殖。

16. 自营菌:以无机物为原料;
异营菌(腐生菌:以无生命的有机物质为营养物质;
寄生菌:以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。

17. 细菌营养物质:水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。

18. 细菌个体的生长繁殖方式:无性二分裂,在对数期以几何级数增长。

19. 细菌分类(伯杰)等级依次为界、门、纲、目、科、属、种(最小分类单位)。

20. 常用的细菌培养方法是:需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法。

21. 通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板,置于空气或含5%~10%CO2的气缸中培养,大部分细菌可于24~48h生长良好。

22. 透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构;
扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。

23. 细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→初染→染色(媒染)→(脱色)→(复染,使脱色菌体着色)。

24. SS琼脂有较强的抑菌力,用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强,可影响检出率,所以,使用时最好加一种弱选择平板以配对互补。

25. 碱性琼脂或TCBS琼脂用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。

26. 痰标本:血平板、中国蓝/麦康凯、巧克力平板作分离。

27. 中国蓝/麦康凯用于筛选G-杆菌。

28. 含杆菌肽的巧克力平板(含有V和X因子)用于筛选嗜血杆菌。

29. 连续划线分离法:杂菌不多的标本。

分区划线分离法:杂菌量较多的标本。

30. 斜面接种法:该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。

31. 倾注平板法:牛乳、饮水和尿液细菌计数。

32. 涂布接种法:常用于纸片法药物敏感性测定,也可用于被检标本中的细菌计数。

33. 半固体培养基用于观察细菌的动力(沿穿刺线生长呈模糊或根须状,并使培养基变混浊为动力阳性) 34. 双环:在菌落周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二圆圈。

35. 氧化-发酵试验(O/F试验):有氧参加——氧化型(专性需氧);
无氧降解——发酵型;
不分解葡萄糖而分解蛋白胨——产碱型。(肠杆菌科细菌发酵型全+)。

将待检菌同时接种于2支HL培养基中,其中1支滴加无菌液体石蜡,35℃培养2天或更长时间,观察结果。氧化型细菌在无氧环境中不能分解葡萄糖,故仅不加石蜡的培养基产酸;
发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都分解葡萄糖,故2支培养基均产酸;
产碱型细菌不分解葡萄糖,故2支培养基均无变化。

36. 甲基红试验(与V-P试验相反):阳性红色,阴性黄色。大肠埃希菌(+),产气肠杆菌(-)。

球菌 1. 葡萄球菌属:G+,触酶阳性、耐热、耐干燥、耐高盐,是抵抗力最强的无芽胞细菌。

2. 表皮葡萄球菌:触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素敏感(医院感染,血培养污染)。

3. 腐生葡萄球菌:触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素耐药(尿路感染)。

4. 金黄色葡萄球菌:触酶试验、凝固酶试验(最简单)、耐热DNA酶试验、甘露醇发酵试验均阳性。对新生霉素敏感。透明溶血环。

SPA 葡萄球菌A蛋白 为完全抗原 有种属特异性 无型特异性 结合在细胞壁的黏肽部分 具有抗吞噬作用 90%以上的金葡菌株有此抗原 可与IgG的Fc段结合 致病性:感染(化脓性感染,食物中毒,表现为急性胃肠炎),医院内感染,毒素性疾病。主要致病物质有血浆凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素、表皮溶解毒素和毒性休克综合征毒素等。

耐药性检测:检耐甲氧西林金葡菌(MRSA),耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRSE),耐万古霉素金葡菌(VRSA),耐万古霉素表皮葡萄球菌(VRSE)。NCCLS/CLSI推荐用头孢西丁纸片法检测mecA基因介导对苯唑西林耐药的葡萄球菌。

5. 链球菌属:链球菌属为触酶阴性,兼性厌氧,呈圆形或卵圆形的革兰阳性球菌,在液体培养基中生长时易形成长链而表现为沉淀生长(但肺炎链球菌为混浊生长)。触酶试验阴性,能分解葡萄糖产酸不产气,对其他糖类的分解因不同菌株而异。有些链球菌分解精氨酸产氨、水解七叶苷、马尿酸盐及淀粉等。还有些链球菌可耐受65g/lnac和胆汁。抗力不强,对各种常用消毒剂敏感,60℃加热30分钟即可杀灭。

链球菌属的鉴定:①胆汁七叶苷试验;②Optochin敏感性试验;马尿酸盐水解试验;④CAMP试验;⑤杆菌肽敏感试验。⑤optochin敏感试验。

A群链球菌(猩红热)——杆菌肽敏感;

B群链球菌(败血症、肺炎、脑膜炎、咽喉炎)——CAMP试验阳性(与金葡菌,箭头状溶血),水解马尿酸;

D群链球菌——七叶苷试验阳性(40%胆汁培养基,变黑);

甲型(α)溶血性链球菌:菌落呈灰色针尖状,菌落周围有1~2mm宽的草绿色溶血环,故又称草绿色链球菌。本菌为条件致病菌。

乙型(β)溶血性链球菌:通称溶血性链球菌,菌落较小,灰白色,菌落周围有2~4mm宽的透明溶血环。该型细菌致病性最强,常引起人和动物多种疾病。

丙型(γ)链球菌:呈灰白色细小菌落,在菌落周围无溶血环。一般无致病性。

人类链球菌感染中85%以上由A群链球菌引起,对青霉素G高度敏感,化脓型链球菌:杆菌肽敏感试验阳性。

6. 肺炎链球菌:混浊生长,有荚膜(荚膜肿胀试验:阳性),大叶性肺炎。分解菊糖、胆汁溶解试验阳性、Optochin敏感试验阳性——与草绿色链球菌鉴别。

肺炎链球菌的鉴定试验:①胆汁溶解试验;②菊糖发酵试验;③动物试验;④英膜肿胀试验;⑤optochin敏感试验。

7. 肠球菌属:G+,肠球菌属为革兰阳性,成双或短链状排列的卵圆形球菌,无芽胞,无荚膜,部分肠球菌有稀疏鞭毛,营养要求高,需氧及兼性厌氧,触酶阴性,在胆汁七叶苷和含65%Nacl培养基中可以生长,此点可与链球菌鉴别。

8. 奈瑟菌属:G-双球菌,无鞭毛,无芽胞,有菌毛。专性需氧,氧化酶阳性。

9. 脑膜炎奈瑟菌:流行性脑脊髓膜炎(简称流脑),空气传播,对人致病的主要是A群。氧化酶、触酶试验阳性;
分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气。

10. 淋病奈瑟菌:不酵解麦芽糖与蔗糖、30%H202试验阳性(与脑膜炎奈瑟菌鉴别)。

11. 卡他莫拉菌:社区呼吸道感染的主要病原体之一。

肠杆菌科 1. 肠杆菌科:均为G-杆菌。均不形成芽胞。多数有周鞭毛(运动),少数菌属细菌可形成荚膜。发酵葡萄糖产酸、产气,触酶阳性。(鉴别肠道致病菌和非致病菌常选用葡萄糖发酵试验)。

菌体(O)抗原,鞭毛(H)抗原和表面抗原(如Vi抗原、K抗原)少数菌属如志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛,无运动能力。

2. 大肠埃希菌:俗称大肠杆菌,肠道正常菌群。泌尿系统感染。超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要产酶株。尿素酶试验阴性,吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验(IMViC)++--,克氏双糖铁琼脂(KIA)上斜面和底层均产酸产气,H2S阴性,动力、吲哚、尿素(MIU)++-。硝酸盐还原、动力多数阳性。

引起肠道感染的大肠埃希菌有下列五个病原群 (1)肠产毒性大肠埃希菌(ETEC):引起霍乱样肠毒素腹泻(水泻);

(2)肠致病性大肠埃希菌(EPEC):主要引起婴儿腹泻;

(3)肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC):可侵入结肠黏膜上皮,引起痢疾样腹泻(黏液脓血便);

(4)肠出血性大肠埃希菌(EHEC):又称产志贺样毒素(VT)大肠埃希氏菌(SLTEC或UTEC),其中O157:H7(常规检测项目)可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征(HUS)。临床特征为严重的腹痛、痉挛,反复出血性腹泻,伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭;

(5)肠黏附性大肠埃希菌(EAggEC):腹泻;

与志贺菌相鉴别:醋酸钠和葡萄糖铵利用试验及粘质酸盐产酸三种试验。大肠埃希菌均为阳性,而志贺菌均为阴性。

3. 志贺菌属:痢疾杆菌(细菌性痢疾)。我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最常见。强选择鉴别培养基——沙门、志贺菌选择培养基(SS);
弱选择培养基——麦康凯或中国蓝培养基。

分解葡萄糖产酸不产气,不分解乳糖(宋内志贺菌可迟缓分解乳糖),MR试验阳性,只有O抗原而无鞭毛抗原。

4. 沙门菌属:无芽胞,无荚膜的革兰阴性直杆菌。有周身鞭毛(除鸡沙门菌外),能运动,多数有菌毛。

5. 伤寒沙门菌:产酸不产气。动力+、脲酶+,氧化酶一,触酶+,硝酸盐还原+。肥达试验。S~R变异(光滑变粗糙,生理盐水中自凝);
H~O变异(失去鞭毛);
相位变异(双相变单相);
V~W变异(失去Vi抗原)。

肠热症(伤寒与副伤寒病,慢性发热症状),第一、二周采血液,第二、三周采粪便与尿液。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。) 6. 变形杆菌属:迁徙生长。具有尿素酶,可以水解尿素,产生氨 7. 普通变形杆菌:靛基质和麦芽糖均阳性,鸟氨酸脱羧酶阴性;
奇异变形杆菌相反。

外-斐反应:普通变形杆菌OX19、OX2、0Xk的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原,是用以诊断某些立克次体病的依据。

8. 鼠疫耶尔森菌:鼠疫。两极浓染。“钟乳石”状。28~30℃。KIA结果利用葡萄糖,不利用乳糖,不产H2S,MIU均为阴性反应,丙氨酸脱氨酶试验呈阴性反应即可初步鉴定。

9. 小肠结肠炎耶尔森菌:无芽胞,无英膜、25℃培养时形成周鞭毛,呈翻滚旋转状运动,37℃培养无动力翻滚旋转状运动。分解葡萄糖和蔗糖产酸不产气,绝大数菌株不发酵乳糖,硫化氢阴性,脲酶阳性,靛基质不定。鸟氨酸脱羧酶阳性,脲酶阳性。

10. 假结核耶尔森菌:两端浓染。25℃培养有周鞭毛,有动力,37℃培养无动力。

11. 肺炎克雷伯菌:医院感染,有荚膜,无鞭毛,无芽胞,G-杆菌。灰白色大而黏的菌落,长丝状。触酶阳性、脲酶阳性。动力和鸟氨酸脱羧酶阴性是本菌的最大特点。易产超广谱β-内酰胺酶。对氨苄西林天然耐药。

12. 肠杆菌属(阴沟肠杆菌、产气肠杆菌)有周鞭毛,能运动。IMVC:肠杆菌属多为--++;
而大肠埃希菌是++--。

13. 黏质沙雷菌:革兰阴性细小杆菌。沙雷菌具DNA酶和葡萄糖酸盐阳性(与其他菌属细菌的根本区别)。

弧菌科 1. 弧菌科:G-杆菌。共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖。弧菌属极端鞭毛、甘露醇、脂酶、生长需要NaCl、对O129敏感五项为+++++。

2. 霍乱弧菌(耐碱不耐酸,pH8.4~9.2时生长最好)——霍乱(米泔水样粪便);
副溶血性弧菌(嗜盐性弧菌,无盐不生长,绿色菌落)——食物中毒(海产品)。

不染色标本穿梭流星状运动(鱼群状);
O1群霍乱弧菌诊断血清,如果原运动活泼的现象停止(为制动试验阳性)。

3. 副溶血性弧菌:是一种嗜盐性弧菌。常存在于近海海水、海产品及盐渍食品中。副溶血性弧菌的生化反应培养基需加入30g/L NaCl,本菌在70g/L NaCl培养基中生长,在无盐或100g/L NaCl培养基中不生长。致病因子有黏附因子(主要为菌毛)、毒素(如耐热性溶血素、TDH类毒素),所致疾病为食物中毒及急性胃肠炎,常为被污染的海产品及盐腌制品所引起,此菌尚可引起浅表创伤感染、败血症等。

4. 气单胞菌属:在65g/L NaCl中不生长。氧化酶试验阳性可与肠杆菌科细菌鉴别,发酵葡萄糖可与非发酵菌鉴别。

弯曲菌和幽门螺杆菌 1. 弯曲菌属:是一类微需氧,不分解糖类,氧化酶阳性,菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状,有动力的革兰阴性菌。

2. 幽门螺杆菌:是一类氧化酶和过氧化氢酶均阳性、微需氧、在37℃能够生长,在25℃和42℃均不能生长的革兰阴性弯曲的细菌。

厌氧菌 1. 厌氧菌:一类是革兰染色阳性有芽胞的厌氧芽胞梭菌(外毒素),另一类是无芽胞的革兰阳性及革兰阴性球菌与杆菌(正常菌群,条件致病性的内源性感染)。气-液相色谱分析。

有芽胞的厌氧菌只有梭菌属;
放线菌感染——硫黄样颗粒。

常规血培养阴性的细菌心内膜炎、并发脓毒症血栓性静脉炎、伴有黄疸的菌血症等,应考虑可能有厌氧菌感染。厌氧菌标本的采集多采用特殊的采集方法,如针筒抽取等。

2. 破伤风梭菌:常见的一种芽胞杆菌,能引起破伤风。当机体受创伤时,破伤风梭菌可侵入伤口生长繁殖,产生外毒素,引起机体强直性痉挛、抽搐,称为破伤风。破伤风梭菌的致病物质主要是外毒素又称痉挛毒素。

3. 产气英膜梭菌:临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌,能分解肌肉和结缔组织中的糖,产生大置气体,导致组织严重气肿,继而影响血液供应,造成组织大面积坏死。

4. 肉毒梭菌:一种寄生菌,能产生极强的外毒素。在厌氧条件下可产生极其强烈的外毒素一肉毒素。

5. 艰难梭菌:梭菌属的一种专性厌氧菌,对氧十分敏感,很难分离培养,故得名。

需氧或兼性厌氧菌 1. 白喉棒状杆菌:G+,异染颗粒、毒力试验,Elek平板,亚碲酸钾血琼脂。外毒素(毒血症)只有携带β-棒状噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素。

2. 炭疽芽胞杆菌:人畜共患病,是致病菌中最大的革兰阳性杆菌,竹节状。倒松树状。(皮毛—皮革厂)。串珠试验。

3. 蜡样芽胞杆菌:表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状。干热120℃经60分钟才能杀死。

4. 产单核李斯特菌:20℃有动力,37℃动力缓慢,冷增菌(4℃)。伞状生长。通过胎盘或产道感染新生儿。本菌常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增多症。

分支杆菌 1. 各型结核杆菌均不发酵糖类,能产生过氧化氢酶,耐热触酶试验、聚山梨酯-80水解试验和耐热磷酸酶试验均为阴性,脲酶试验和中性红试验均为阳性。

2. 卡介苗:毒力变异(减弱)保留抗原性。被动人工免疫。

3. 麻风分枝杆菌:泡沫状,麻风细胞。

不发酵菌 1. 不发酵菌:不发酵或不分解糖类的G-无芽胞需氧杆菌。

2. 铜绿假单胞菌:无芽胞,无英膜。有1~3根鞭毛,运动活泼。氧化酶阳性,能氧化分解葡萄糖、木糖,产酸不产气。本菌能利用枸檬酸盐,不产生明除,不产生HS能液化明胶,分解尿素,还原硝酸盐并产生N2,最适温度为35℃,但在4℃不生长,此点可与荧光假单胞菌区别 3. 不动杆菌属:生物学特征为“三阴”,即氧化酶、硝酸盐还原试验、动力阴性。临床重要的不动杆菌属细菌为醋酸钙不动杆菌、鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌 4. 产碱杆菌属:在含有蛋白胨的肉汤中产氨,可使pH上升至8.6。

5. 军团菌属:人工管道的水源中常存在此菌,如医院空调冷却水中常有此菌,对常用化学消毒剂敏感。活性炭-酵母浸出液琼脂。肺部感染。

其他阴性杆菌 1. 流感嗜血杆菌:G-短小杆菌。加热血平板。(与金葡菌)卫星现象。脑膜炎。荚膜上的多糖抗原被称为M抗原。需要X因子、Ⅴ因子。

2. 副流感嗜血杆菌:不需要Ⅹ因子。杜克嗜血杆菌本菌生长需要X因子,不需要Ⅴ因子。

3. 杜克嗜血杆菌:可引起软性下疳。

4. 百日咳鲍特菌:鲍-金培养基。

5. 布鲁菌属:人畜共患病,菌血症,波浪热。首选多西环素。

衣原体 1. 衣原体:是一群体积较小,能通过细菌滤器,细胞内专性寄生,并有独特发育周期的原核细胞型微生物。鸡胚卵黄囊。

原体:为成熟的衣原体。吉姆萨染色呈紫色,Macchiavello染色呈红色。在细胞外较为稳定,无繁殖能力,但有高度感染性。

始体(网状体):吉姆萨染色和Macchiavello染色均呈蓝色。为衣原体发育周期中的繁殖型,代谢活泼,不能自胞外存活,无感染性。

衣原体细胞壁LPS为属特异性补体结合抗原。

2. 沙眼衣原体(2SP培养基。碘液染色阳性):沙眼,非淋菌性泌尿生殖道感染(男性常见),性病淋巴肉芽肿。

3. 鹦鹉热衣原体:典型临床表现为非典型肺炎 立克次体 1. 立克次体:是一类严格寄生在细胞内的原核细胞型微生物。菌体内同时含有DNA和RNA。

普氏立克次体常以人的体虱为传播媒介,流行性斑疹伤寒(又称虱传斑疹伤寒)。流行性斑疹伤寒的外斐反应效价在1:160时有诊断意义。

2. 莫氏立克次体(斑疹伤寒立克次体,外斐反应):贮存宿主是鼠类,主要传播媒介是鼠蚤或鼠虱,地方性斑疹伤寒(又称鼠型斑疹伤寒)。

3. 恙虫病立克次体:通过恙螨幼虫叮咬传给人类,引起恙虫病。贝纳柯克斯体(又称Q热立克次体)引起Q热。

支原体 1. 支原体:是一类无细胞壁、呈高度多形态性,能通过除菌滤器,在人工培养基上能生长繁殖的最小原核型微生物。革兰染色为阴性。无细胞壁仅有细胞膜是与细菌区别的主要特点。菌落呈“荷包蛋”样。

支原体对青霉素不敏感 因为青霉素的作用机制为抑制肽聚糖的合成 肽聚糖为细胞壁的组成成分 而支原体无细胞壁 2. 肺炎支原体:酒瓶状。是人类原发性非典型性肺炎的主要病原体之一。补体结合试验(≥1:64~1:128为阳性)(检测IgM抗体) 螺旋体 1. 伯氏疏螺旋体,莱姆病,硬蜱;

2. 回归热螺旋体,流行性回归热,体虱;

3. 梅毒螺旋体(镀银染色),梅毒,性传播;

4. 钩端螺旋体:Fontana镀银染色法染成深褐色。钩体病(人畜共患病及自然疫源性疾病)。发病1周内血液的阳性率高,1周后尿和脑脊液等的阳性率高。

5. 梅毒的临床病程分三期:
第一期为硬性下疳,极易传播感染,也适于涂片镜检;

第二期即梅毒疹期,全身皮肤黏膜出现皮疹,伴有淋巴结肿大,可累及骨、关节、眼及中枢神经系统;

第一、二期称早期梅毒,传染性强,破坏性较小。部分早期梅毒可进一步发展到第三期梅毒,即晚期梅毒。病损部位螺旋体少但破坏性大。严重者可出现心血管和中枢神经系统受损,可危及生命。后天性梅毒表现为反复隐伏发病和再发的特点;

病毒 1. 噬菌体是病毒;

2. 流行性感冒病毒:正黏病毒科。血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA),划分流感病毒亚型的依据。常用鸡胚接种培养,初次分离接种羊膜腔为最佳,传代适应后可移种尿囊腔。细胞培养一般用原代猴肾细胞(PMK)或犬肾传代细胞(MDCK)。不耐热,对干燥、日光、紫外线以及甲醛、乙醇等均敏感。

3. 呼吸道合胞病毒:单负链RNA 副黏病毒科 不能在鸡胚中增殖,引起婴幼儿下呼吸道疾病的最常见的病毒。最常见的传播途径是经飞沫传染,最易引起婴幼儿细支气管炎和细支气管肺炎 包膜上的F蛋白 为融合蛋白 介导病毒穿入和细胞融合 4. 麻疹病毒:飞沫直接传播。麻疹疫苗,8月龄接种。

5. 肠道病毒:属小RNA病毒科肠道病毒属。由粪-口途径传播。是人类最常见最重要的病毒。脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒 6. 轮状病毒:(秋季腹泻)婴幼儿急性腹泻的主要病因 7. 流行性乙型脑炎病毒:可通过三带喙库蚊叮咬传播,引起流行性乙型脑炎,简称乙脑。猪为最重要的宿主和传染源。

8. 登革病毒:登革热。埃及伊蚊和白纹伊蚊等传播 9. 巨细胞病毒:猫头鹰眼特征 10. 甲肝病毒:毛蚶 11. 乙型肝炎病毒:DNA病毒,其他肝炎病毒均为RNA病毒。

12. 狂犬病病毒:嗜酸性包涵体(内基小体)。神经兴奋性增高,恐水病。

13. HPV:只能感染人的皮肤、黏膜的上皮细胞。尖锐湿疣主要由HPV-6引起 14. 朊病毒(亚病毒,还包括类病毒、卫星病毒)就是蛋白质病毒,是只有蛋白质而没有核酸的病毒。中枢神经系统退化性病变 真菌 1. 酵母型细胞和菌丝、孢子被染为革兰阳性(深紫色)。

2. 假丝酵母菌(俗称念珠菌):出芽繁殖(芽生孢子)。芽管形成试验,假菌丝。沙保弱培养基。玉米粉培养基形成厚膜孢子。

3. 新型隐球菌:有荚膜,折光性强。印度墨汁作负染色。尿素酶试验阳性。

4. 鉴定曲霉菌常用察氏琼脂。

5. 卡氏肺孢菌病:AIDS最常见、最严重的机会感染性疾病。

6. 马尔尼菲青霉菌:可引起马尔尼菲青霉病(感染)。

药敏试验 1. 扩散法(K-B法):选择直径6.35mm,吸水量20μl的专用药敏纸片。质控菌株采用标准菌株是进行质控的主要措施,应从可靠的菌种保藏中心索购,金黄色葡萄球菌ATCC25923,大肠埃希菌ATCC25922,铜绿假单胞菌ATCC27853及粪肠球菌ATCC29212或ATCC33186用于对试验结果进行监测。琼脂稀释法是细菌药敏试验的金标准。释法所测得的某抗菌药物抑制待测菌生长的最低浓度为最低(或最小)抑菌浓度(MIC),稀释法也可测定最小杀菌浓度(MBC)。

质控菌株的一般保存方法是高层琼脂保存 是最简单的保存菌种方法 将细菌接种于半固体培养基中 35℃培养18-24h 封盖1cm厚的无菌石蜡油 置4℃保存 最长可保存1年 细菌不死亡 但性状可能发生变异 2. 细菌耐药的机制 (1)产β-内酰胺酶是细菌对β-内酰胺类药物耐药的主要机制。

(2)产生钝化酶如氨基糖苷类钝化酶、氯霉素乙酰转移酶等。

(3)青霉素结合蛋白的改变如MRSA的耐药机制。

(4)药敏作用靶位的改变如核糖体位点的改变引起大环内酯类、林可霉素耐药。

(5)抗菌药物渗透障碍。

3. 消毒是去除或杀灭大多数微生物的过程。灭菌是去除或杀灭所有微生物的过程。

寄生虫 1. 终宿主是指寄生虫的成虫或有性生殖阶段所寄生的宿主。

2. 中间宿主是指寄生虫的幼虫或无性生殖阶段所寄生的宿主。

3. 寄生虫病的流行:传染源,传播途径,易感人群。

4. 寄生虫病的防治原则是:①控制传染源;②切断传播途径;③保护易感者。

5. 蠕形住肠线虫又称蛲虫。根据蛲虫在肛周产卵的特性,检查虫卵应在肛门周围皮肤上取材。方法有:夜间肛周查雌虫、粪便中查虫体等。

6. 班氏吴策线虫和马来布鲁线虫的形态:①成虫:两种丝虫成虫的形态相似,虫体细长如丝线,乳白色,体表光滑;②微丝蜘:虫体细长,所以能在毛细血管内自由游动。在新鲜血片上,虫体作蛇样运动。感染期幼虫(丝状坳):虫体细长,尾端乳突。

7. 华支睾吸虫成虫虫体狭长、扁平,外形呈葵花籽仁状。虫卵是人体常见蠕虫虫卵中最小者。成虫主要寄生在肝胆管内。

8. 布氏姜片吸虫是人体寄生虫卵中最大的一种。在粪便或呕吐物中检到虫体或虫卵即可确诊。

9. 卫氏并殖吸虫虫卵内有一个卵细胞和10多个卵黄细胞。

10. 卫氏并殖吸虫第一中间宿主为川卷螺,第二中间宿主为淡水溪蟹、石蟹和蛹站等。

11. 日本血吸虫成虫:雌雄异体,成虫在宿主体内呈雌雄合抱状态。

12. 链状带绦虫的虫卵具放射状条纹,内含一个发育成熟的六钩坳。

13. 人是猪带绦虫的唯一终宿主,猪(或人)是中间宿主。

14. 牛是肥胖带吻绦虫主要中间宿主。人是牛带绦虫的唯一终宿主,只被成虫寄生。

15. 溶组织内阿米巴的生活史基本过程为包囊一滋养体一包囊。

16. 黑热病典型的临床表现是长期不规则发热、脾显著肿大、贫血及白细胞、血小板减少,血清球蛋白明显增高。

17. 阴道毛滴虫仅有滋养体期而无包囊期,寄生于泌尿生殖道。

18. 蓝氏贾第鞭毛虫的病原检查首选粪便检查,方法有生理盐水直接涂片法等。

19. 环卵沉淀试验(COPT)是以血吸虫整卵为抗原的特异免疫血清学试验。

补充 1. 拟线粒体 中介体 2. 耐高温 耐湿物品灭菌 高压蒸汽灭菌法(103.4kPa 15-30分钟) 间歇灭菌 主要运用于不耐100℃物品的灭菌 每日一次流通蒸汽加热 取出再置37℃孵箱过夜 使残存的芽孢发育成繁殖体 次日再通过流通蒸汽加热 使之被杀灭 干烤箱杀灭芽胞的条件为160℃2h 3. 半固体穿刺保存法应加入的液体石蜡高度约为1cm 4. 普通光学显微镜 其通常使用的自然光或灯光的波长为0.5um 5. 血清学鉴定 用含有已知特异性抗体的免疫血清(诊断血清)与分离培养的未知纯种细菌或标本中的抗原进行血清学反应 以确定病原菌的种或型 血清学诊断 用已知细菌的特异性抗原检测患者血清中相应抗体 以诊断感染性疾病 6. 菌种保存 培养后最好在细菌尚未旺盛发育之前取出 放冰箱保存 链球菌 肺炎链球菌 可接种于血琼脂斜面保存 肠道杆菌 葡萄球菌 可接种于不含糖的普通琼脂斜面 脑膜炎奈瑟菌 宜用巧克力斜面保存 2天移种一次 沙门菌 适于保存在鸡蛋斜面 霉菌、放线菌及芽胞菌保存2-4个月移种一次 酵母菌间隔2个月 普通细菌1个月 假单胞菌两周穿代一次 7. 微生物鉴定系统 将全部反应每3项为一组 根据反应的次序 第一个反应阳性记录1分 第二项反应阳性记录2分 第三项反应阳性记录4分 阴性反应结果均记录0分 8. 极端厌氧 氧分压为0.05%-0.5% 中度厌氧 氧分压为2%-8% 微需氧 5%-10%CO2 9. 不能在人工培养基上生长的微生物 衣原体 立克次体 病毒 麻风分支杆菌 螺旋体(钩端螺旋体除外) 注:支原体是可在无生命培养基上生长的最小的原核生物型微生物 10. 人畜共患 鹦鹉热衣原体 立克次体 红斑丹毒丝菌 产单核李斯特 布鲁菌 炭疽芽胞杆菌 11. 非淋球菌性尿道炎最常见的病原体为沙眼衣原体沙眼生物型 解脲脲原体为第二位 12. 有芽胞的细菌 炭疽芽胞杆菌(芽胞位于菌体中央 小于菌体) 蜡样芽胞杆菌(芽胞位于中心或次级端 椭圆形) 破伤风梭菌(芽胞位于菌体顶端 圆形且大于菌体 “鼓槌状”) 产期荚膜梭菌(芽胞位于中央或次级端 椭圆形 小于菌体) 肉毒梭菌(芽胞位于次级端 卵圆形 大于菌体 “汤匙状”“网球拍状”) 13. 无鞭毛 动力(-) 嗜血杆菌 不动杆菌 莫拉菌 黄杆菌 肺炎克雷伯菌 志贺菌 耶尔森菌 白喉棒状杆菌 炭疽芽胞杆菌 红斑丹毒丝 分支杆菌 14. 细菌分类方法 以细菌的形态和生理生化特征为依据 传统分类法和数值分类法 以化学分析和核酸分析为依据 种系分类/自然分类 15. 碱性染料电离带正电 酸性染料带负电 16. 脂酶试验主要用于鉴别厌氧芽胞梭菌属的细菌 其中产芽胞梭菌、肉毒梭菌和诺维梭菌为阳性 其他为阴性 17. 分离鉴定病原菌时应选择最敏感的动物作实验对象 小白鼠对肺链 破伤风外毒素敏感 豚鼠对结核 白喉易感 幼猫对金葡菌肠毒素敏感 18. 无菌动物 是经剖宫产取出 无论体内或体表均无微生物存在 对各种病原体感受性相同 体内不含任何抗体 悉生动物 是指给无菌动物引入已知5-17种正常肠道菌从培育而成的动物 近交系动物 一般称为纯系动物 指采用兄妹交配繁殖20代以上的纯品系动物 19. 实验室分类分级 分类1)一般生物安全防护实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫) 2)实验脊椎动物生物安全防护实验室 分级 根据所处理的微生物的危害程度分为四级 一级安全防护要求最低 四级最高 一级:对健康成年人无已知致病作用的微生物 如教学微生物室 二级:对人或环境有中等潜在危害的微生物 三级:主要通过呼吸道传播 引起严重或致死疾病的致病微生物 HIV研究应在三级实验室进行 四级:对人体具有高度危险性 通过气溶胶传播或传播途径不明的致病微生物 20. 生物安全柜 Ⅰ级生物安全柜:至少装置一个高效空气过滤器净化排气,空气由操作窗吸进去而不可能由操作窗逸出,工作状态时保证工作人员不受侵害 但不保证实验对象不受污染 Ⅱ级生物安全柜:工作空间为经HEPA净化的无涡流单向流气体,工作状态时既保证工作人员不受侵害,也保证实验对象不受污染 Ⅲ级生物安全柜:工作空间为经高效空气过滤器净化的无涡流单向流空气,手套箱内对外界保持负压,确保人体与柜内物品完全隔绝,既可保证工作人员的安全,又可保证实验对象不受污染,可进行挥发性放射性核素及高度危险的实验材料的操作。

22.0.5号麦氏比浊管内含细菌浓度为1.5亿/ml 23.丙二酸盐利用试验 深蓝色(+) 淡绿色(-) 生化 糖代谢 1、糖的无氧酵解途径是在无氧情况下,葡萄糖分解生成乳酸的过程。它是体内糖代谢最主要的途径;

2、糖氧化的主要方式是有氧氧化;

3、1 分子 GLU 通过无氧酵解生成 2ATP;

4、1 分子 GLU 通过有氧氧化生成 36/38ATP;

5、正常空腹血糖3.89~6.11mmoll;

6、糖异生是指由非糖物质转变为葡萄糖的过程),是体内单糖生物合成的唯一途径。肝脏是糖异生的主要器官,长期饥饿、酸中毒时肾脏的异生作用增强;

7、胰岛素是胰岛β细胞分泌的多肽类激素,主要作用有促进细胞摄取葡萄糖;促进糖原合成,减少糖原分解;促进糖氧化和分解,加速糖的利用;促进甘油三酯的合成和储存;阻止糖异生作用。

8、升高血糖浓度的最重要的激素是胰高血糖素。

9、调节血糖浓度的主要激素是胰岛素和胰高血糖素。

10、维持血糖恒定的关键器官是肝脏。

11、1型糖尿病主要指由胰岛β细胞破坏而导致内生胰岛素或C肽绝对缺乏,临床上易出现酮症酸中毒。

12、2型糖尿病包括了以前所称NIDDM,即Ⅱ型或成年发病糖尿病,患者多数肥胖。此型不发生胰岛β细胞的自身免疫性损伤。很少自发性发生嗣症酸中毒,但可在应激情况下,如感染而诱发。

  13、诊断糖尿病        1. 任意 GLU≥11.1 mmol/L        2. 空腹 GLU≥7 mmol/L(禁食≥8h)       3.OGTT(75g无水葡萄糖), 2h GLU≥11.1 mmol/L 血糖浓度>7.0mmol/l(126mg/dl)称为高血糖症;

血糖浓度<2.78mmol/l(50mg/d)称为低血糖症;

分娩后无论是否持续,均可认为是妊娠期糖尿病;
妊娠结束后6周复查。

11、糖尿病急性代谢综合征 糖尿病酮症酸中毒 DKA,酮体包括丙酮、乙酰乙酸和β-羟基丁酸;

非酮症性高渗性糖尿病昏迷 NHHDC;

血糖极高,没有明显酮症酸中毒,高渗性脱水;

乳酸酸中毒 LA  有PH降低 12、测定血糖 全血比血浆低 12%-15%,血糖每小时下降 5%-7%;

血糖含量,餐后:动脉>毛细血管>静脉;
空腹:动脉>静脉>毛细血管;

1. 葡萄糖氧化酶法(GOD-POD):葡萄糖氧化酶法+过氧化物酶(UA、Vc、BIL、谷胱甘肽使得结果偏低),我国常用;

2.  己糖激酶法(HK):己糖激酶+葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 ,参考方法;

均 340nm 检测 高血糖症 GLU>7 mmol/L;

低血糖症 GLU<2.8 mmol/L;

OGTT 试验(75g无水葡萄糖,儿童1.75g/kg不超过75g);

正常糖耐量 空腹<6.1 mmol/L,30-60min达到高峰  120min恢复正常(<7.8mmol/L);

糖尿病性糖耐量 空腹≥7 mmol/L,1h后出现高峰,峰值(≥11.1mmol/L),2h不能恢复正常;

糖耐量受损(IGF) 空腹6.1-7 mmol/L,2h:7.8-11.1mmol/L;

空腹血糖受损(IFG)  空腹6.1-7 mmol/L ,2h<7.8mmol/L;

2h血糖水平是最重要的判断指标;

糖化血红蛋白(GHb) 6-8周,HbA1c 参考值 4%~6%;

糖化血清蛋白 2-3周,硝基四氮唑蓝(NBT),550nm 检测,血清中白蛋白<30g/L,或尿蛋白大于1g/L时,结果不可靠;

胰岛素水平降低常见于1型糖尿病,空腹值常<5U/ml;
胰岛素水平升高可见于2型糖尿病;

C 肽分泌胰岛素,也可等分子地释放 C 肽,C 肽与外源性胰岛素无抗原交叉反应,不受外源性胰岛素影响,I型糖尿病低,2型糖尿病高。

两餐间血糖水平主要靠肝脏维持;

空腹低血糖的反复出现,常提示有特殊的器质性疾病,其中最常见的原因是胰岛β细胞瘤,也称胰岛素瘤。该病80%为单个良性腺瘤,10%为恶性肿瘤,10%为多发。

临床中,胰岛β细胞瘤常于清晨空腹或餐后4~5h发作,不能自行缓解,且饥饿或运动可引起低血糖发作;

  血脂代谢 1、脂蛋白颗粒的密度从CM到HDL是由小变大,分子的大小则是由大变小;

2、CM含TG最多,高正常空腹12h无CM,血中4℃过夜形成一层“奶酪”,载脂蛋白主要是ApoB48;

3、VLDL,载脂蛋白主要是ApoC和B100;

4、IDL是VLDL向LDL转换的中间产物,正常含量极低,载脂蛋白主要是ApoB100;

5、LDL含TC最高,血浆中70%TC在LDL中,载脂蛋白主要是ApoB100;

6、血浆胆固醇主要存在于LDL中,其次为HDL和VLDL, CM中含量最少 7、HDL 是在肝和小肠合成的,体积最小的脂蛋白,含蛋白量最大,主要作用摄取脂质和蛋白质,主要蛋白是ApoAI,预防动脉粥样硬化的形成;

8、由于LDL-C是冠心病的危险因素,所以最多用于判断是否存在患CHD的危险性,也是血脂异常防治的首要靶标。

9、年WHO建议将高脂蛋白血症分为6型(I、IIa、IIb、III、IV和V型),此法分型缺点是过于复杂。

TC <5.18 mmol/L ;
TG ≤1.7 mmol/L ;

HDL 男1.16~1.42 mmol/L,女 1.29~1.55 mmol/L;

LDL <3.37 mmol/L;

蛋白质检查 1、PA肝细胞合成,营养不良和肝功能不全有较高的敏感性,半衰期较短(2-5d);

2、白蛋白(Alb)是血浆中含量最多的蛋白质,占总蛋白的57%~68%;

3、TP,双缩脲法,首选方法,灵敏度低;
参考方法:凯氏定氮法;

4、ALB 溴甲酚绿法(628nm,PH4.2);

5、清蛋白/球蛋白,A/G,正常1-2/1。当A/G比值<1时,称比值倒置,为慢性肝炎或肝硬化的特征之一;

6、急性时像反应蛋白:CRP、铜蓝蛋白(诊断Wilson)、α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性蛋白酶、转铁蛋白、α2-巨球蛋白(血浆中分子量最大);

诊断酶学 1、血浆特异性酶 血浆中发挥作用的酶;
肝内合成 CHE、CER、LPL;

2、非血浆特异性酶 胰(淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶)、胃(蛋白酶)、前列腺酶;

3、CK,GGT男高于女;

4、同一个酶有几种底物时,则对每一种底物各有一特定的Km值,其中Km值最小的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物降;

5、国际单位(IU或U),在最适宜的条件下,1min 催化 1µmol 底物反应所需要的酶量;

6、CK共有三种同工酶即CK-BB(CK1脑、肺)、CK-MB(CK2骨骼肌、心肌)和CK-MM(CK3心肌),主要用于心肌梗死的诊断。

心肌梗死发生后2~4h此酶即开始升高,12~48h达最高峰值,可高达正常上限的10~12倍,在2~4d降至正常水平。连续监测法测定(偶联反应),340nm;

7、乳酸脱氢酶(LD)在人体中,以心、肾、骨骼肌含量最丰富;

8、血清LD同工酶在成年人存在着如下规律LD2>LD1>LD3>LD4>LD5;

LD1主要在心肌,LD5主要在横纹肌,肝脏也有,LD3主要在肝、脾;

  9、ALT c- ALT(细胞质,30%)、m- ALT(线粒体,70%)   1. 急性病毒性肝炎:>500U;

  2. 慢性活动性肝炎/脂肪肝:ALT 轻度升高,AST  >ALT;

  3. 部分/轻度无黄疸性肝炎—ALT 升高不明显;

  4. 慢性迁延性肝炎ALT 小于参考值的 3 倍;

  5. 慢活肝ALT大于参考值 的 3-5 倍;

AST/ALT(DeRitis 比值),参考值:1.15;

DeRitis:急性肝炎 <1;
肝硬化 ≥2;
肝癌 ≥3;

9、ALP ALP和年龄有关(骨骼生长),妊娠也会升高;

含量:肝>肾,骨骼及肝胆系统疾病;

无黄疸而 ALP 持续性升高提示肝占位性病变;

磷酸对硝基酚(底物)、2-氨基-2-甲基丙醇(缓冲液)—405nm 处比色;

10、GGT 含量:肾>前列腺,酗酒增高;

11、AMY 流行性腮腺炎、急性胰腺炎升高;

405nm 处比色—ALP、GGT、AMY、ACP;

新生儿缺乏,5岁后 达成人水平;

血清淀粉酶:8-12h 开始升高,12-24h达高峰,2~5d下降至正常。

尿淀粉酶:12-24h 升高;

体液平衡 1、细胞外液中主要的阳离子是Na+(不吃不排),对维持细胞外液的渗透压、体液的分布和转移起着决定性的作用;
细胞外液的主要阴离子以Cl-、HC03-为主;

2、细胞内液的主要阳离子是K+(不吃也排)、Mg2+;

3、体液摩尔渗透量 294-296mOsm/L;

4、阴离子隙(AG)是指细胞外液中所测的阳离子总数和阴离子总数之差,即正常人血清Na+、k+之和与HC03-、CI-之和的差值为AG值;

AG正常参考值为8~16mmol/L,平均12mmol/L;

5、影响肾脏排钾的主要因素是醛固酮;

6、高渗性脱水以水丧失为主,电解质丢失较少,多见于饮水不足;

7、低渗性脱水以电解质丢失为主,病因多见于丢失体液时,只给补充水而不补充电解质造成;

8、体液酸碱平衡的改变也影响肾脏对钾的排泌,酸中毒时,尿钾增多;碱中毒时,尿钾减少;

9、钾钠氯测定方法中,目前所有离子检测最为简便准确的是离子选择电极法;

10、低Na血症<135 mmol/L;
高Na血症>145 mmol/L;

11、低钾<3.5 mmol/L ;
高钾>5.5 mmol/L;

12、AB=SB<正常,代酸未代偿。AB=SB>正常,代碱未代偿。AB>SB,呼酸或代碱。AB<SB,呼碱或代酸。

13、人体PH:7.35-7.45 14、BB:缓冲总碱,包括 HCO3\Pr\Hb 15、BE:1L 的血液滴定至 7.4 所需的酸或碱量,用酸滴定+号,参考值±3mmol/L 16、血气分析 :用肝素抗凝,如 30min 不能检测,将标本放在4℃中,≤2h 钙、磷、镁 1、钙盐和磷酸盐是人体含量最高的无机盐,约99%的钙和86%以上的磷存在于骨骼和牙齿中。

2、钙降低肌肉兴奋性,引起肌肉收缩,[Ca]×[P]=30-40;

3、肠管的ph可明显地影响钙的吸收,偏碱时减少钙的吸收,偏酸时促进吸收 4、镁主要存在于细胞内,是细胞内含量仅次于钾的阳离子。

5、长期丢失消化液(如消化道造瘘)是缺镁的主要原因。肾是镁排泄的主要途径 6、维持血钙正常水平最重要的调节因素是甲状旁腺激素,它有升高血钙、降低血磷和酸化血液等作用。

7、降钙素是主要功能是降低血钙和血磷 8、铁是体内含量最丰富的微量元素。是血红蛋白的主要成分 9、检测常规方法                          Ca:甲基麝香草酚兰法、邻甲酚酞络合铜法     Mg:甲基麝香草酚兰法     P:磷钼酸法、染料法、酶法     Fe:双联吡啶比色法 参考方法均为:原子吸收 10、微量元素 1/1 万以下(Fe(最多)、Zn、Cu、Mn…….) 11、谷胱甘肽过氧化物酶的必须组成成分是硒(克山病),钴是维生素B12 重要辅助因子,Wilson病铜明显降低。

药物浓度 1、药物吸收是指药物从给药部位进入循环系统的过程。

2、药物分布的速度取决于该组织的血流量和膜通透性。

3、生物转化是机体对药物进行的化学转化和代谢,是提高药物极性和水溶性,使大多数药物失去药理活性,有利于药物的排出体外。

4、在药物动力学中,生物转化与排泄两过程的综合效果叫消除。

5、吸收速度常数(Ka)表示药物在使用部位吸收入体循环的速度。Ka值增大,血药浓度的峰值也升高,但峰时减少。

6、吸收分数(F)表示药物进入体循环的量与所用剂量的比值。

7、消除速度常数(K)表示药物在体内代谢、排泄的速度。K值增大,血药浓度下降。

8、生物半衰期(t0. 5)是药物在体内消除一半所需要的时间。

9、临床需监测的药物主要是在高血药浓度时,药物的毒性或副作用较大的药物。

10、常需要测定的药物 强心苷类药物:地高辛等;
抗癫痫药类药物:苯妥英、苯巴比妥等;
免疫抑制剂药物:环孢素A、FK506等。

抗哮喘药物:茶碱;

11、标本取样时,必须标明患者的用药情况,一般怀疑中毒情况时,要在用药后,峰值时取样。

心脏标志物 1、CK,心肌梗死发生后2~4h此酶即开始升高,12~48h达最高峰值,可高达正常上限的10~12倍,在2~4d降至正常水平;

2、肌红蛋白Mb,Mb 1-3h上升,6-9到峰值,24-36恢复正常水平,Mb的阴性预测值为100%,胸痛1-12h,Mb阴性可排除心梗。

 1. 筛查 AMI(灵敏度高)  2. 溶栓有无灌注  3.升高最早的标志物 3、肌钙蛋白cTn, 3~6h升高,发病10-120h内检测敏感性达100%高峰时间于发病后10~48h左右出现;

 1. 最特异的指标、首选  2. AMI 最好的标志物  3. 估计梗死面积(正相关)+心功能  4. 围手术期心脏受损程度  5. 微小心肌梗死  6. 非 ST 段抬高心梗首选 4、CK 监测再梗的首选指标 5、目前BNP/NT-PROBNP主要应用于心衰的诊断、鉴别诊断及预后分析。

肝胆疾病 1、内生及外来物质主要在肝脏进行生物转化;

2、初级胆汁酸=胆酸+鹅脱氧胆酸;
次级胆汁酸=脱氧胆酸+石胆酸;

3、胆红素代谢 在滑面内质网进行,需要葡萄糖醛酸转移酶;

4、ALT L,丙氨酸+α-酮戊二酸(340nm),肝细胞非特异性酶;

5、AST,天门冬氨酸+α-酮戊二酸(340nm),肝细胞非特异性酶;

m-AST协助判断肝实质损害程度,是干细胞坏死的指征;

6、PCHE 假性胆碱酯酶,肝脏合成;

7、GGT与AFP同样具有癌胚蛋白性质,是胆汁淤积、胆道梗阻最敏感的酶;

8、GGT、ALP同时升高,肝脏疾病;
GGT正常,ALP高 ,骨骼疾病;

9、胆红素在尿密啶核苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶的催化下,胆红素被转化为单、双葡萄糖醛酸结合胆红素,形成水溶性的结合胆红素;

10、IV型胶原与肝纤维化及肝脏炎症坏死有关,是纤维形成的活动指标,观察肝硬化的主要指标;

11、透明质酸由成纤维细胞和间质细胞合成反应肝纤维化程度;

肾损伤 1、肾单位由肾小球、小球囊腔、近曲小管、髓祥和远曲小管组成,集合管不包括在肾单位内;

2、尿中的K主要是由远曲小管和集合管分泌的;

3、多尿 >2500ml/24h;
少尿 <400ml/24h;
无尿 <100ml/24h;

4、肾小球血量 1600L ;
终尿 1~2L/24h;

5、GFR 肾贮备能力散失 30-60GFR(ml/min);

氮质血症期 25GFR(ml/min);

肾功能衰竭期 <10GFR(ml/min)(低钙、高血磷);

肾小球滤过率,菊粉清除率为理想;

血肌酐是反映GFR减退的后期指标。当肾小球GFR功能减退至50%时,Scr仍可正常,患者Cc降至正常水平的约1/3时,Sc有明显上升,且上升曲线斜率会陡然变大,在此阶段Scr是氮质血症病情观察和疗效判断的有效指征;

1. 内生肌酐清除率试验(肾小球的滤过功能) 无肌酐饮食 3d,限制蛋白质摄入,避免剧烈运动,实验前收集 24h 尿,禁服咖啡、茶、等利尿物质;

清除率(ml/min)=[U(µmmol/L)×V(ml)]/P(µmmol/L);

参考值:>80 ml/min;

蛋白尿,尿蛋白定量>0.15g/24h;

肾病综合征,血 ALB<30g/L;

5、血肌酐的测定 1. 碱性苦味酸法(Jaffe 法,340nm 处比色):特异性差;
―非肌酐色源‖(正干扰)—丙酮(酸)、乙酰乙酸、叶酸、V c、GLU、甲氧噻吩头孢;
动力学方法(20s、80s 比色);

2. 肌酐酶法:肌酐酶+肌酸激酶+丙酮酸激酶+乳酸脱氢酶;

6、血中UA全部通过肾小球滤出,在近端肾小管几乎被完全重吸收,主要用作痛风(嘌呤代谢)的诊断指标 7、尿素的测定 蛋白质外的含氮部分(非蛋白质氮,NPN),更能反映 GFR 的功能,酶偶联速率法(尿素酶法,340nm 比色);

8、渗透量 1. 质量渗透摩尔(Osm):1kg 水中含有 1mol 不能电离的物质(1osm/kg H2O);

2. 体积渗透摩尔:1L 水中含有 1mol 不能电离的物质(1osm/L);

参考值:
1. 尿渗量(Uosm):600-1000 Osm/kg H2O 2. 维持在 300 Osm/kg H2O—等渗尿 3. <200 Osm/kg H2O—低张尿(严重受损) 9、渗透溶质清除率(Cosm) :远端肾单位每 min 能把多少 ml 血浆中具有渗透压物质加以清除;

10、肾小球—肾小球滤过率(GFR)+内生肌酐清除率(Ccr)+血肌酐(Cr)+尿素(BUN)+尿酸(UA)+血 β2-微球蛋白;

11、肾小管—酚红排泄率(近端小管)+浓缩-稀释实验(远端小管);

自由水清除率,更能反映浓缩稀释功能;

12、早期损害:
肾小球—1.mAlb(微量白蛋白,RIA 测定)尿 mAlb指尿中mAlb排出置在30~300mg/2小范围内,即已超出正常上限,但尚未达临床蛋白尿水平的中间阶段;

UTf(尿转铁蛋白)尿 尿蛋白选择性(SPI)=IgG 清除率/Tf 清除率(≤0.1:高度选择性;
≥0.2: 非选择性) 肾小管—尿 LMWP(<50KD,低分子量蛋白)+溶菌酶 13、肾小管标志物 Uα1-M(肝、淋巴细胞合成,LMWP 首选,逐渐取代Uβ2-M);

Uβ2-M(近端小管重吸收)—酸性条件不稳定,pH≤5.5, 25℃ 24h 可下降 80%,主要用于小管损伤;

尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(UNAG),肾皮质含量丰富,在近曲小管含量丰富,肾小管的损伤指标;

胰腺疾病 1、血AMY可通过肾小球过滤,唯一能正常出现在尿中的酶,胰腺炎首选 ,>500 高度怀疑胰腺炎, 参考值AMY ≤220U/L ,2-12h升高,12~24h达峰值,2~5d后恢复正常;

2、尿 AMY ≤1200U/L 12-24h升高;

3、血清脂肪酶,急性胰腺炎时,发病后4~8h内升高,24h达峰值,一般持续10~15d,腮腺炎、巨淀粉酶血症不升高(鉴别胰腺炎);

4、胰蛋白酶—敏感而特异→急诊筛选;

急性胰腺炎时,血蛋白酶和淀粉酶平行升高,峰值可达参考值上限的 2-400 倍;

内分泌 1、体内各种激素是在神经系统的参与下,主要的调节是通过下丘脑·垂体-内分泌腺-激素系统进行的调控I131 摄取试验 甲亢摄取速度快(峰前移)、量多、诊断率达 90%;

2、判定甲状腺功能最基本的筛选试验室血清总甲状腺素(TT4)测定。

3、TT3是早期Graves病疗效观察及停药后复发的敏感指标 4、TRH 兴奋试验 静脉注射TRH→TSH 升高,可排除 Graves 病(Graves 病可反馈抑制 TSH,导致 TSH 不被 TRH 兴奋) 5、肾上腺髓质激素:儿茶酚胺类(NE、E、DA)、儿茶酚胺的代谢物—VMA(测定收集 24h 尿液,用 6mol/L 的 HCl 作为防腐剂);

6、嗜铬细胞瘤,好发于肾上腺髓质,胰高血糖激发试验,特异性最高,糖尿病患者禁用;

7、肾上腺皮质:球状带(醛固酮)+束状带(糖皮质激素+皮质醇+皮质酮)+网状带(雌激素);

8、17-OHCS(17-羟皮质类固醇,皮质醇+皮质酮+17 羟孕酮+11-脱氧皮质醇)反应皮质醇的含量;

9、17-KS(17-酮类类固醇);

10、肾上腺皮质紊乱的首选项目:血皮质醇+24 小时尿游离皮质醇;

11、库欣综合征=依赖 ACTH 的库欣综合征(库欣病(垂体)+异位 ACTH 综合征)+不依赖 ACTH的库欣综合征(肾上腺);

12、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)呈脉冲式分泌,上午8时~10时最高,夜间则为上午的1/2。

13、原发性肾上腺皮质功能减退(Addison 病) ACTH上升,皮质醇下降;

14、继发性肾上腺皮质功能减退 ACTH下降,皮质醇下降;

15、生长激素缺乏症又称为垂体性侏儒症。

16、巨人症及肢端肥大症由生长激素分泌过多而致。

  17、性激素:雄激素+雌激素+孕激素;

18、可以预测排卵的常用血清性腺激素是黄体生成素、FSH;
孕酮确证排卵;
泌乳素过多可导致性腺功能低下;
E2作为女性早熟诊断指标;

常用分析技术 1、Beer 定律 A=k×b(1cm)×c(1mol/L);

2、层析技术 理化性质差异,在两项分配比(含量比)不同,随流动相向前移动,各组分在两项中再分配;

3、离子交换层析:流动相中离子能进行交换,分离氨基酸组分、蛋白质;

4、亲和层析:分离物质和它的特异性配体具有特异性亲和力,可纯化大分子;

5、米氏方程Km:V=1/2Vmax 时的底物浓度;
  免疫学检验   1、免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。

2、免疫应答分为识别阶段、活化阶段和效应阶段。

3、识别阶段,是巨噬细胞等抗原递呈细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T辅助细胞及相关淋巴细胞的阶段。

4、活化阶段,是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增殖,分化的阶段。

5、效应阶段,是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。

7、免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。

8、中枢免疫器官是免疫细胞发育为成熟免疫细胞的场所,它包括骨髓和胸腺。

9、成年人和动物所有血细胞及淋巴细胞的发源地是骨髓。

10、T细胞发育的重要中枢器官是胸腺。

11、外周免疫器官及组织包括淋巴结、脾、黏膜伴随的淋巴组织。富含血管的最大外周淋巴器官是脾。

12、自然杀伤细胞来源于骨髓造血干细胞,其发育成熟依赖于骨髓及胸腺微环境。

13、免疫球蛋白是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞后产生的、执行体液免疫功能的一组球蛋白。

14、抗体是机体在抗原刺激下,由浆细胞合成分泌产生的具有免疫功能的球蛋白。

15、所有抗体是球蛋白,但不是所有的球蛋白都是抗体。

16、Igg是血清中含量最高的免疫球蛋白,是再次免疫应答的主要抗体,也是唯一能通过胎盘的抗体。

17、补体的激活途径有经典途径、替代途径、MBL途径。

18、正常血清中,含量最高的补体成分是C3、C4 19、细胞因子:由免疫细胞分泌具有生物活性的多肽或小分子蛋白质的总称,生物活性常表现为多效性、重叠性、拮抗效应和协同效应。

20、抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定族(表位)和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。

21、抗原抗体结合力:1. 静电引力;
2. 范德华力(最小);
3. 氢键结合力;
4. 疏水作用力(最强) 22、抗原与抗体结合的特异性,是两者在化学结构和空间构型上呈互补关系所决定的。

23、抗原抗体比例合适时,沉淀物形成快而多,称为等价带。

24、抗体过量时,称为前带;
抗原过量,称为后带 25、单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。

26、85%Nacl溶液或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。

28、抗原抗体反应一般在pH值为6~9之间进行,反应温度为37℃。

29、颗粒性抗原包括各种细胞、细菌、寄生虫等。

30、半抗原即是在独立存在时只具有抗原性而无免疫原性的物质。

31、半抗原与蛋白质载体或高分子聚合物结合后才有免疫原性。

32、常用的蛋白质类半抗原载体以牛血白蛋白最常用。

33、弗氏佐剂(最常用免疫动物):弗氏不完全佐剂(羊毛脂+液体石蜡)+卡介苗。

34、R(兔)—宽—诊断试剂、 H(马)—窄—免疫治疗。

35、初次免疫:皮内注射;
 加强免疫/颗粒型抗原,静脉注射;
. 宝贵抗原,淋巴结注射;
(第 1 次、第 2 次免疫间隔时间为 10-20d,第 3 次为 7-10d)。

36、IgG类抗体的纯化方法有盐析法、凝胶过滤法、离子交换层析法、亲和层析法等。

37、免疫脾细胞免疫用抗原尽量提高其纯度和活性,免疫途径多用腹腔内或皮内多点注射法。

38、脾淋巴细胞特征是抗体分泌功能和能在选择培养基中生长,骨髓瘤细胞则可无限分裂既永生性。细胞融合的选择培养基有三成份:次黄嘌呤(H)氨甲蝶呤(A)胸腺嘧啶核苷(T)称为HAT培养基。

39、凝集反应 凝集反应分为两个阶段,抗原抗体的特异性结合和出现可见的颗粒凝聚。

细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原,在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称直接凝集反应。

玻片法凝集法主要用于抗原的定性分析,也用于人类ABO血型的测定。

试管凝集试验可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。如肥达试验、外斐试验,输血时也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。

间接凝集(可溶性抗原):正向间接(测抗体);
反向间接(测抗原);
间接凝集抑制(抗原、抗体都可测);
协同凝集(可用于细菌病毒的直接检测) 间接血凝试验原理是将抗原(或抗体)包被于红细胞表面,成为致敏载体,然后与相应的抗体(或抗原)结合,从而使红细胞被动的凝聚在一起,出现可见的红细胞凝集现象。

40、沉淀反应 沉淀反应分的第一阶段中,抗原抗体发生特异性结合,几秒到几十秒即可完成,出现肉眼不可见的可溶性小复合物。

抗原过量时,使浊度反而下降,光散射亦减少,钩状效应。当反应液中抗体过量时,随着抗原递增而增加,至抗原、抗体最适比例处达最高峰,这就是经典的海德堡曲线理论。

与免疫浊度法测定密切相关的因素有抗原抗体的比例、抗体的质量、抗原抗体反应的溶液、增浊剂。

免疫球蛋白定量测定常用的方法有单向琼脂免疫扩散法和免疫比浊法。

单向扩散试验平板法是将抗体或抗血清混入0.9%琼脂凝胶内。

扩散试验平板法结果中,沉淀线靠近抗原孔,提示抗体量大。

血清蛋白区带电泳技术是检测蛋白质的经典分析方法。

血清免疫球蛋白定量测定可作为检测M蛋白的初筛试验。

免疫电泳(I正P)是区带电泳技术和免疫扩散技术相结合的一种免疫学分析方法。

免疫固定电泳(IFE)技术是区带电泳技术与特异性抗血清的免疫沉淀反应相结合的一种免疫学分析方法。

冷球蛋白又称冷免疫球蛋白,是一组在低温下发生沉淀,加温后又复溶的免疫球蛋白。一般在-4℃时发生沉淀,于37℃时又复溶解。

41、放射免疫:竞争法;
免疫放射:非竞争法;
使用最广的是I125, 42、荧光免疫技术 荧光效率是指荧光物质分子将光能转变成荧光的百分率。

常用的荧光素有:异硫氰酸(FITC、最常用);
四乙基罗丹明(RB200);
四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC);
藻红蛋白(R-RE) 时间分辨荧光免疫测定以镧系元素铕(EU3+,应用最广)合物为荧光标记物,偏振免疫测定的偏振波长是485 常用标记蛋白的方法有:搅拌法和透析法。荧光抗体鉴定包括效价及荧光素与蛋白的结合率,大于1:16为理想,一般固定标本的荧光抗体以F/P=1.5为宜用于活细胞染色的以2.4为宜。

  免疫荧光显微技术实验中,直接法操作简便,特异性高,非特荧光染色因素少。

间接荧光法可用于检测抗原和抗体。本法的第一抗体为针对抗原的特异抗体。

荧光显微镜与普通光学显微镜主要结构基本相同,不同之处在于光源、滤光片、聚光器和镜头等。

43、酶免技术 HRP是目前在酶联免疫吸附试验中应用最为广泛的标记用酶。

邻苯二胺被认为是HRP虽为敏感的色原底物之一。

TMB已成为目前ELISA中应用最广泛的底物。

塑料制品一般用聚苯乙烯 固相膜免疫测定中常用的膜为玻璃纤维素膜,尼龙,聚偏氟乙烯(PVDF)膜和硝酸纤维素膜等。其中最常用为硝酸纤维素膜(NC)膜。

双抗体夹心法测抗原,用抗体结合在微孔滤膜中央,滴加待检标本,若标本中为待测抗原则与膜上抗体结合,然后滴加金标抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。

间接法测特异性抗体,用抗原包被在微孔滤膜上,滴加待测标本,滴加洗涤液洗涤后,滴加金标抗抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点(胶体金聚集) ELISA是用酶标记抗原或抗体作标志物,用于检测液体样品中可溶性抗原或抗体含量的微量分析技术。

均相酶免疫测定,是利用酶标志物与相应的抗原或抗体结合后,标记酶的活性会发生改变的原理。

均相酶免疫测定主要用于小分子激素和半抗原的测定。

ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。本法有三个必要的试剂:①固相的抗原或抗体;②酶标记的抗原或抗体;③酶反应的底物。

双抗体夹心法属于非竞争结合测定,是检测抗原最常用的方法,适用于检测含有至少两个抗原决定簇的多价抗原。

竞争法测定不同于单个抗原决定簇的小分子抗原的竞争法,其测定的可靠性主要受竞争抗体的特异性和亲和力影响。

检测抗体中的捕获法,又称反向间接法。主要用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定,目前最常用的是病原体急性感染诊断中的IgM型抗体。

44、化学发光技术 吖啶酯:最常用的直接化学发光剂;
电化学发光:三联吡钌 45、生物素-亲和素 酶标链霉亲和素—生物素方法的特点:①敏感性高;②低背景着色;③第一抗体工作浓度低;④操作简便。

46、免疫细胞分离 纯淋巴细胞群的采集主要的方法有:①黏附贴壁法;②吸附柱过滤法;③磁铁吸引法;④Percoll分离液法。

外周单个核细胞的分离的分层液常用:Ficoll(由上到下为:血浆,单个核细胞,粒,红)和Percoll(由上至下:死细胞,单个核细胞,淋,红,粒) T、B细胞和T细胞亚群的分离常用的方法有:磁性微球分离法、荧光激活细胞分离仪分离法。

分离细胞的短期保存技术:将分离的细胞用适量含10%~20%灭活小牛血清的Hankstc-199、RPMI 1640或其他培养液稀释重悬。短期可置于4℃保存。

分离细胞的长期保存技术:液氮深低温(-196℃)环境保存细胞,加入二甲亚碱作为保护剂。

活力测定最简便常用的为台盼蓝染色法。

47、淋巴细胞表面标志物 T细胞表面主要的CD抗原有:①CD2:表达于全部人T细胞和NK细胞表面,因其能与绵羊红细胞结合,又称绵羊红细胞受体。②CD3:是一种多链的糖蛋白,表达于全部T细胞表面,是T细胞的表面标志,是TCR-CD3复合物的重要组成部分。

B细胞活化后转化为浆细胞,分泌抗体,执行体液免疫功能。

B细胞表面膜免疫球蛋白的检测:Smlg是B细胞最具特征性的表面标志。

CD抗原检测:B细胞表面存在着、CD19 CD20 CD22等抗原。

  人类NK细胞表面标志主要以CD16、CD56来认定。

单核一吞噬细胞的典型表面标志是CD14 树突状细胞是一大类专职抗原递呈细胞,主要有两种来源,即髓系和淋巴系。

淋巴细胞表面标志检测评价免疫功能的重要指标。在评价免疫功能时经常采用CD4CD8比值。

48、淋巴细胞功能检测  检测T细胞增殖反应的方法有:①形态学检查法;②3H-TDR掺入法;③MTT比色法。

MTT比色法的敏感性虽不及3H-TDR掺入法,但操作简便,无放射性污染。

T 细胞介导的细胞毒试验:与一定比例的 L 混合培养,观察杀伤情况。

T细胞功能体外试验通常用PHA刺激淋巴细胞的增殖、转化试验来判断T细胞的功能。

  B细胞主要产生Ig参与机体体液免疫应答,B细胞功能低下或缺乏对外源性抗原刺激的应答能力减弱或缺陷,特异性抗体产生减少或缺如。

溶血空斑试验:直接法只能测IgM,每一个空斑中央含一个抗体形成细胞,空斑数目即为抗体形成细胞数。

体内试验:注入 Ag 一段时间后检测 Ab 细胞因子是由活化的免疫细胞及某些基质细胞表达并分泌的活性物质,其主要生物学功能是介导和调节免疫应答及炎症反应,其化学本质是蛋白质或多肽。

促进细胞增殖和抑制细胞增殖测定法:放射性核素掺入法、MTT比色法。

49、抗病毒活性测定法主要用于IFN等细胞因子的检测。

50、流式细胞仪的工作原理是采用激光作为激发光源。

51、球蛋白 按重链分IgG、igA、igM、igD和IgE 5类。

IgG是血液和细胞外液中的主要抗体,也是机体再次免疫应答的主要抗体。

IgG有4个亚类,即IgG1、igG2、igG3、igG4,正常人体血中含量依次减少,Igg1最多,Igg4最少。

IgA可分为血清型和分泌型两类血清型lga主要以单体形式存在,分泌型Ig的由链连接的二聚体和分泌成分组成,是参与黏膜局部免疫的主要抗体。

Igm为五聚体,是分子量最大免疫球蛋白,又称巨球蛋白。

IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白,IgG最多。

M蛋白(MP)是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白。

52、补体检测 补体大多为糖蛋白,属于β球蛋白,Cla、c8等为y球蛋白,Clsc9为α球蛋白。正常血清中补体各组分含量相差较大,其中C3含量最高。

补体的性质不稳定,易受各种理化因素的影响,加热、紫外线照射、机械振荡、酸碱和酒精等因素均可破坏补体。

经典途径是以抗原抗体复合物结合,C1启动激活的途径,顺序:14235678。

MBL途径是甘露聚糖结合凝集素(MBL)结合至细菌启动的途径。

旁路途径是通过微生物表面等膜性物质,从C3开始,由B因子、D因子参与激活过程,也称第二途径、旁路途径。

补体最主要的活性是溶细胞作用。

50%溶血标准管做CH50实验时,应同时配制50%溶血标准管。

严重肝病或营养不良时,可不同程度地引起血清补体水平的下降。

补体结合试验(CFT),是将免疫溶血作为指示系统,用以检测另一反应系统中抗原或抗体的传统方法。

53、细菌性感染性疾病检测 化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌,能产生多种毒素(链球菌溶血素O和S)、M蛋白、脂磷壁酸、链激酶和透明质酸等致病因子,最常用的免疫学实验室检查是抗链球菌溶血素“O“(ASO)检测。

链球菌溶血素“O“(ASO)是一种具有溶血活性的蛋白质,能溶解人类和一些动物的红细胞,具有一定的抗原性,能刺激机体产生相应抗体。

肥达反应,伤寒沙门菌有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原,三者的抗体均为非保护性抗体。由于(O)与(H)抗原的抗原性较强故常用于做血清凝集试验(肥达反应)辅助临床诊断。

产生凝集时抗体效价≥1:80为阳性,或双份血清效价呈倍以上增长,结合流行病学资料可以作出诊断。

高滴度的抗PPD抗体可作为结核病辅助诊断的手段。

曲霉感染以肺部病变最为常见。

人轮状病毒(HRV)是引起婴幼儿胃肠炎和腹泻的主要病毒病原体,也是能引起较大儿童及成人腹泻的主要病原体。

白念珠菌是临床标本中最常见的真菌感染。

54、病毒感染性疾病检测 甲型肝炎病毒(HAV)是甲型肝炎的病原体,主要经粪-口途径传播感染。

含有前S1的蛋白主要存在于Dame颗粒和管型颗粒上。

HDV是一种缺陷病毒,只有在HBV已存在于肝内或与HBV同时侵入肝内才可能造成感染。

55、超敏反应 超敏反应发生的速度、机制和临床特点等,将其分为四型:I型超敏反应,即速发型超敏反应;Ⅱ型超敏反应,即细胞毒型或细胞溶解型超敏反应;Ⅲ型超敏反应,即免疫复合物型或血管炎型超敏反应;IⅣ型超敏反应,即迟发型超敏反应。

I型超敏反应主要由特异性Ig抗体介导产生,IgE+速发型+速度最快+无补体,肥大、嗜酸、嗜碱。

I型超敏反应的发生过程可以分为三个阶段,即致敏阶段、激发阶段、效应阶段。

I型超敏反应分为全身性与局部性超敏反应两种。

全身超敏反应又有药物过敏性休克、血清过敏性休克。

局部超敏反应又有呼吸道过敏反应、消化道过敏反应、皮肤过敏反应。

免疫学检查:
1.皮肤试验(挑刺) 2.皮内试验:1.(注入量(0.01-0.02ml)、两种 Ag 距离 2.5-5.0cm、阳性对照(盐酸组胺);
2.挑刺试验(安全、假阳性少、敏感度低) 参与Ⅱ型超敏反应的抗体主要IgG和IgM、少数为gA,细胞毒/细胞溶解反应I。

常见Ⅱ型超敏反应性疾病有:输血反应、新生儿溶血症等。

直接Coombs试验即可直接监测红细胞表面有无不完全抗体的试验称为直接Coombs实验。

间接Coombs试验即用已知的不完全抗体检测受检红细胞上相应的抗原,或用已知抗原的红细胞检测受检血清中相应的不完全抗体,称为间接Coombsi试验。

常见Ⅲ型超敏反应性疾病局部免疫复合物病有两种反映:Arthus反应、类Arthus反应。

常见疾病:血清病、 链球菌感染后肾小球肾炎、 RA、SLE 常见Ⅳ型超敏反应性疾病:感染性迟发型超敏反应、无补体、无IG、接触性皮炎、移植排斥反应。

Ⅳ型超敏反应的常见免疫学检测是Ⅳ型超敏反应皮肤试验。

结核菌素皮试,是检测Ⅳ型超敏反应典型的例子。

斑贴试验,主要用于检测IⅣ型超敏反应,寻找接触性皮炎的变应原。

56、自身免疫性疾病 与自身抗原形成主要相关的因素如下:隐蔽抗原的释放、自身成分的改变、共同抗原引发的交叉反应。

干燥综合征(SS):抗SSA/RO抗体、抗SSBLA抗体通常为阳性。

硬皮病:抗SCJ-70抗体是PSS的特异性抗体。

目前最常用间接免疫荧光法(IF)作为总的ANA筛选试验。

常见的ANA荧光图形中均质型:斑点型、核腹型、核仁型。

抗Sm抗体仅发现于SLE患者中,是SLE的血清标志抗体。

抗核RNP抗体是诊断MCTD的重要血清学依据,列入MCTD(混合型结缔组织病)的诊断标准。

抗]o-1抗体最常见于多发性肌炎(PM),故又称为PM-1抗体。

抗SC1-70抗体几乎仅在进行性系统性硬皮病患者中检出。

类风湿因子(RF)是一种抗人或动物Igg分子Fc片段抗原决定簇的抗体,是以变性Igg为靶抗原的自身抗体。

抗CCP抗体主要为IgG类抗体。

57、免疫增殖性疾病 多发性骨髓瘤可以出现血沉增快,血中检出M蛋白和不明原因的蛋白尿。

巨球蛋白血症是以分泌lgm的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病。

血清免疫球蛋白定量:正常血清中k/γ比例约为2:1,当k/γ比率大于4:1或小于1:1时应考虑k型或γ型M蛋白血症。

M蛋白是由浆细胞单克隆性增殖而大量产生的在类别、亚类、基因型和独特型均一的免疫球蛋白。

58、免疫缺陷性疾病 肿瘤+感染性疾病+营养不良+免疫抑制疗法是引起继发性免疫缺陷病最常见的原因。

HV抗原检测常用ELISA法检测HIV的核心抗原p24, HIV抗体检测:HⅣ感染后2~3个月可出现抗体,并可持续终身,此为艾滋病的常规检测指标。

59、肿瘤免疫 甲胎蛋白是胎儿发育早期,由肝脏和卵黄囊合成的一种血清糖蛋白,胎儿出生后不久即逐渐消失,通常成人血清中AFP的含量极低,参考值<20ugl。

原发性肝癌AFP含量明显升高常>300g/l。妇女妊娠3个月后,血清AFP含量开始升高,7~8个月达到高峰,一般在400ugl以下。

癌胚抗原是一种结构复杂的可溶性糖蛋白,主要存在于成人癌组织以及胎儿的胃肠组织中,故名癌胚抗原。正常情况下,血清Cea<50ug/L 血清CEA升高主要见于①结肠癌、直肠癌;②吸烟者中约有33%的人Cea>5 ug/L。

癌抗原153是一种乳腺癌相关抗原。对乳腺癌的诊断和术后随访监察有一定的价值。

血清CA15-3升高主要见于乳腺癌等。

CA125是很重要的卵巢癌相关抗原。存在于上皮性卵巢癌组织和患者的血清中,参考值<35kU/L 血清CA125升高主要见于卵巢癌等。

 CA19-9是一种与胰腺癌、胆囊癌、结肠癌和胃癌相关的肿瘤标志物,又称胃肠癌相关抗原。

血清CA19-9升高主要见于胰腺癌等疾病。

血清PSA升高见于前列腺癌等。

神经元特异性烯醇化酶((NSE)在正常人脑组织中含量最高。血清NSE升高见于小细胞肺癌(SCLC)和神经母细胞瘤等。

原发性肝癌患者血清中AFU活性明显升高。

血清hcg升高见于滋养层肿瘤和生殖细胞肿瘤,如葡萄胎等。

血清降钙素升高见于甲状腺髓样癌等。

60、免疫检验质量保证 室内质量控制(IQC)由实验室工作人员采取一定的方法和步骤,连续评价本实验室工作的可靠性程度,旨在监测和控制本室常规工作的精密度,提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性。并确定当批的测定结果是否可靠,可否发些检验报告。

室间质量评价(EQA)为客观地比较某一实验室的测定结果与靶值的差异,由外单位机构,采取一定的方法、连续、客观地评价实验室的结果,发现误差并校正结果,使各实验室之间的结果具有可比性。

诊断敏感性是指将实际患病者正确地判断为阳性(真阳性)的百分率。

诊断特异性是指将实际无病者正确地判断为阴性(真阴性)的百分率。

临床基础检验 1、血浆渗透压:290-310mOsm/kg·H2O;

2、严重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈樱红色;

3、采血时,止血带结扎时间应小于1min;

4、乙二胺四乙酸盐能与血液中钙离子结合成鳌合物,使Ca7失去凝血作用,阻止血液凝固;

5、草酸盐溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀,使钙离子失去凝血作用,阻止血液凝固;

6、肝素主要是加强抗凝血酶灭活丝氨酸蛋白酶的作用,阻止凝血酶的形成,并有阻止血小板聚集等作用,从而阻止血液凝固;

7、枸模酸钠与血液的抗凝比例为1:9或1:4;

8、红细胞计数:男性(4-5.5)×1012/L;女性(3.5-5.0)×1012/L;新生儿(6-7)×1012/L;

9、RBC 异常结构:嗜碱性点彩(变性 RNA,铅中毒)、豪焦小体、卡波环(脂蛋白变性产物);

10、HiCN 比色法是在 540nm 处比色(参考方法。SHb 不能反应);

11、血红白蛋:男性:120-160g/L;
女性:110-150 g/L;

12、小红细胞 <6µm;
大红细胞 >10µm;
巨红细胞 >15µm;

13、MCV=Hct/RBC(fl);

        MCH=Hb/RBC(pg);

        MCHC=Hb/Hct(g/L);

14、Ret 计数:0.8-2%(计数 1000 个);
骨髓造血恢复重要参数,减少见于再障;

15、Ret 类别 1 型(丝球型);
2 型(网型);
3 型(破网型);
4 型(点粒型);

16、红细胞数量减少使血沉加快,数量增多使血沉减慢。红细胞直径越大血沉越快,球形红细胞、镰形红细胞使血沉减慢;

17、正向急性时相反应蛋白:①α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、C3、C4、Fg、CRP 上升;

18、反向急性时相反应蛋白:前白蛋白、ALb、转铁蛋白下降;

19、白细胞计数:(4-10)×109/L;
PLT:(100-300)×109/L;
公式=N/20×109/L;

20、血涂片分布:淋巴细胞在头、体部分比较多,而尾部和两侧以中性粒细胞和单核细胞较多,异常大的细胞常在片尾末端出现;

21、新生儿白细胞粒系占优势,6-9 天下降与淋巴相等,后淋巴增多,4-5 岁两者相等;

22、粒细胞减少症:N<1.5×109/L;
粒细胞缺乏症:N<0.5×109/L;

23、核左移:杆状核细胞增多和(或)出现中幼粒、晚幼粒、早幼粒>5%;
轻度 >5%;
中度 >10%;
重度 >25%;

再生性核左移:WBC 数上升—感染、急性中毒、急性溶血、急性失血;

退行性核左移:WBC 数不高或降低—AA;

24、核右移:N 的>5 叶>3%、;

25、嗜碱性粒细胞增多:甲亢、糖皮质激素治疗;

26、嗜酸性粒细胞:白天低,夜晚高;
寄生虫、;
肾上腺激素增多,导致嗜酸降低;

27、异常白细胞形态:
毒性变化:大小不均、中毒颗粒、空泡、Dohle 小体(N 中毒性变)、退行性变;

棒状小体;

Pelger-Huet 畸形;

Chediak-Higashi 畸形;

Alder-Reilly 畸形 遗传性疾病;

May-Hegglin 畸形;

毒性指数:计算中毒颗粒占 N(100\200 个)的百分比;
轻度 <0.25;
中度 0.5;
重度 0.75;
极重 1;

异型淋巴细胞:1 型(空泡型,浆细胞型);
2 型(不规则型,M 细胞型);
3 型(幼稚型、L 细胞型);

Russell 细胞:浆细胞形态学改变,见于 MM;

28、血细胞分析仪 电导(C):细胞内部机构;

光散射(S):细胞形态+核结构;

MAPSS(多角度偏振光散射):0°前角光—大小;
90°垂直散射光—核分叶;

RDW 的参考值:<14.5%;

MPV(血小板平均体积)减低见于骨髓病变所致 PLT 减低;

29、血型 红细胞表面抗原有 23 个血型系统。不存在脑脊液(CSF) 中;
O 型血清中以 IgG 为主;

天然抗体(完全抗体,IgM):4-25℃,能盐水反应,ABO 血型 37℃;

免疫抗体(不完全抗体,IgG):,不能在盐水介质中与红细胞反应, Rh 血型;

抗 A、抗 B 和抗 AB 标准血清要求:抗 A、抗 B>1:128;
凝集强度≥1mm2(3min);
冷凝集素<1:4;

抗 A 对 A1、A2、A2B 的红细胞反应时间分别为 15s、30s、45s;

抗 B 对 B 型红细胞反应时间为 15s;

6 个月的婴儿不适宜做血型反定型;

Rh 血型系统无需做反定型;

30、血液保存 全血及RBC:制品 2-6℃,可保存21 天(ACD, A 枸橼酸;
C 枸橼酸三钠;
D 葡萄糖);

浓缩 RBC:2-6℃ 可保存35 天(CDPA-1,+A 腺嘌呤,P 磷酸盐);

浓缩 PLT:20-24℃(水平振荡)可保存7 天;

新鲜冰冻血浆(肝衰竭)、冷沉淀(8 因子):<-30℃ 可保存1 年;

PLT 输注的适应症:PTL 减少+PLT 功能异常(无力、血小板病、巨大血小板综合征,药物引起的 PLT 功能异常);

31、尿液防腐剂:
甲醛:有型成分(尿细胞、管型);

甲苯:化学成分(尿糖、蛋白);

麝香草酚:结核分枝杆菌;

浓 HCl 激素:17-羟、酮、肾上腺素、儿茶酚胺;

冰乙酸:5-HT、醛固酮;

32、尿液理学检查 肉眼血尿:1L 尿中含有血液>1ml;

镜下血尿:离心后,镜下>3 个 RBC/HP;

成人正常1000~2000ml/24h;
少尿<17ml/h或400ml/24h;
无尿<100ml/24h 尿三杯试验:第一杯(+) 尿道;
第一杯、第二杯(+) 膀胱底部、前列腺;
三杯均(+) 肾脏;

Mb 与 Hb 尿的鉴别:Mb 能溶于 80% 饱和(NH4)2SO4 溶液中,而 Hb 不溶;

乳糜尿鉴定:苏丹III;
乳糜尿与脓(菌)尿鉴别:离心法(常用);

菌尿与磷酸盐/碳酸盐尿的鉴别:5-10%的乙酸,产生气泡为碳酸盐尿;

尿比密(随机尿:1.003-1.035);

SG(尿比密):尿在 4℃与同体积纯水的重量之比;

尿液PH>7,结果+0.005;

等渗(张)尿:SG=1.010±0.003;

尿渗量(渗透作用的溶质颗粒);

评价肾脏浓缩-稀释功能的较好指标,优于 SG;

33、尿有形成分检验 400g,离心5min,弃上液,留0.2ml,10高倍视野,20低倍视野;

马耳他十字:黑色背景中嵌有大小不等的明亮球体,为脂肪管型;

蜡样管型:折光性强,切迹或泡沫样,略有弯曲,两端不整齐;

酸性尿:RBC体积缩小;

碱性尿:RBC统考变大;

非均一性 RBC 血尿:RBC体积相差 3-4 倍,肾小球性血尿,不对称曲线;

均一性 RBC 血尿 非肾小球源性血尿,对称曲线;

镜检:管型观察为 20 个视野,其余为 10 个视野 镜下脓尿:>5/HP 病理结晶 胱氨酸结晶:六边,肾或膀胱结石;

亮氨酸结晶:淡黄色/褐色小球或油滴状,折光性强;

酪氨酸结晶:羽毛状;

胆固醇结晶:缺角的长方形;
见于膀胱炎、肾盂肾炎;

胆红素结晶:见于黄疸、肝癌、肝硬化;

34、尿液化学检查 酸碱度 指示剂法(0.4g/L 的溴麝香草酚蓝)晨尿弱酸性,多数标本 pH5.5-6.5,平均 6.0;
随机尿:4.5-8.0。蛋白质摄入多,饥饿状态,尿 pH 下降;
蔬菜、水果(碱性食物),尿 pH 升高;

尿蛋白:溢出性蛋白尿(Hb、Mb、溶菌酶、本周蛋白)、组织性蛋白尿(T-H 蛋白);

150mg/24h或100mg/L为蛋白尿 试带法:蛋白误差原理:PH≥9.0,出现假阳性;
PH≤3.0,假阴性;

加热乙酸法(经典);

磺基水杨酸法(确诊/参考);

加热乙酸法(经典):检出清蛋白+球蛋白;

磺基水杨酸法:检出清蛋白+球蛋白+本周蛋白+糖蛋白,被 NCCLS 确定为干化学法的参考方法,推荐为确证试验。尿中抗生素+退热类药物可假阳性;

尿糖:班氏法(利用还原性);

试带法(氧化酶-或氧化物酶法):氧化性物质(漂白粉、次亚氯酸)、低比重尿—假阳性;
Vc、NaF、阿司匹林、L-多巴、水杨酸、酮体易导致假阴性;

尿糖影响因素:1、血糖浓度;
2、肾血流量;
3、肾糖阈:8.88mmol/L 酮体(KIT):乙酰乙酸(占20%)+β-羟丁酸(占78%,一般试带法无法检测)+丙酮(占2%);

试带法:亚硝基铁氰化钠法;
2. 湿化学法:Rothera 法+Gerhardt 法;

胆红素(BIL):试带法:偶氮法;
利用二氯苯胺重氮盐发生偶联反应,生成红色化合物;
吩(噻)嗪类易导致假阳性;
Vc、亚硝酸盐、苯偶氮、嘧啶易导致假阴性;

胆原(URO)试带法:重氮法(Ehrlich 法-尿胆原,樱红色);
胆色素原、吲哚、胆红素、吩噻嗪类、V k、磺胺类易导致假阳性;

血红蛋白尿(红细胞/Hb):当 Hb>1g/L 时,可随尿排出体外;

试带法:过氧化物酶法(过氧化氢烯钴法),Mb、热不稳定酶、氧化剂、菌尿导致假阳性;
Vc导致假阴性;

WBC:吲哚酚酯、细胞酯酶法;
Vc、抗生素(先锋霉素、庆大霉素)、尿蛋白>5g/L引起假阴性;

Vc:还原法,易导致Hb、BIL、GLU、亚硝酸盐假阴性;

本周蛋白:40~60℃凝固;
90-100℃溶解,56℃左右又凝固;

β2微球蛋白:99.9%近端小管重吸收,评估肾小球和近端肾小管功能;

尿液 hcG:在 5-7 天可检出;
1.7~2天翻倍,8~10周高峰,唯一不随胎盘重量增加而增加的激素;
总HCG与TSH交叉反应,临床一般检查β-HCG;

Tamm-Horsfall蛋白(THP:尿升高—远端小管受损 苯丙酮尿:鼠臭气味;
大蒜臭:有机磷中毒;
腐臭:泌尿系统感染或膀胱肿瘤;
烂苹果味:苯丙酮症酸中毒;

35、尿液分析仪 9 项=8 项+WBC;
10项=9+SG;
11项=10+Vc 尿本周蛋白:40-60℃凝固,90-100℃溶解。

36、粪便检查 送检时间:≤1h;

隐血(OB)检查:素食 3 天。禁止服用 Vc 和铁剂;

消化道出血>50ml 可出现柏油样便;

细菌性痢疾,脓中带血;
阿米巴痢疾,血中带脓;
米泔样,霍乱;

邻联甲苯胺法:易出现假阳性,淘汰,一般常用四甲基联苯胺/愈创木脂法;动物性食品、生食蔬菜可导致假阳性;
Vc可引起假阴性;

免疫法:主要用于下消化道出血检验, 淀粉颗粒:见于消化不良、腹泻病人;

肌肉纤维:见于胰腺功能障碍;

夏科-雷登结晶:见于阿米巴疟疾、过敏性肠炎;

血红素结晶:见于胃肠道出血;

脂肪酸结晶:见于梗阻性黄疸;

37、脑脊液检查 分泌:70%来自于脑室脉络丛分泌,蛛网膜颗粒吸收;
量:平均150ml;
PH:7.31-7.34;

脑脊液检查的适应症;
颅内出血、脑膜白血病肿瘤颅内转移者;

禁忌症:颅内高压、颅后窝占位性病变、处于休克或全身衰竭、穿刺部位有化脓性感染;

标本采集 三管:1病原;
2化学+免疫;
3理学+细胞学;

蛋白质含量增高是血-脑屏障功能障碍的标志;

蛋白>10g/L可出现薄膜或凝块、沉淀;

化脓性脑膜炎:1-2h 出现凝固;

结核性脑膜炎:12-24h内呈薄膜或纤细的凝块;

蛛网膜下腔梗阻:黄色胶样凝固;

神经梅毒:小絮状凝块;
PRP为确诊试验 蛋白质定性:
Pandy(潘迪试验,苯酚)—灵敏度高,假阳性率高;

Ross-Jone 试验—灵敏度低;

定量:比浊法+比色法+免疫学法;

葡萄糖为血浆的50~80,平均60%(2.5-4.4 mmol/L);
氯化物为血浆的1.2-1.3 倍(120-130mmol/L);

38、浆膜腔积液 性状:淡黄色 蛋白质:Rivalta 试验 结核性积液ADA 活性>100U/L,阳性率可达 99% 细胞计数<1h 完成;
AFP>25µg/L—诊断原发性肝癌 CEA 积液/血清>1为恶性积液 39、关节腔积液检查 高度粘稠:粘稠度减低,炎症严重;

化脓性关节炎:细胞总数>5w×106/L;

尿酸痛风、类风湿性关节炎:细胞总数>2w ×106/L;

尿酸盐引起痛风;
磷灰石引起关节炎;
胆固醇引起类风湿、结核性、骨性关节炎;

病原微生物检查:采用生理盐水稀释,不能用草酸盐或乙酸稀释,防止蛋白凝块形成;

40、精液检查 果糖:维持精子生命活动的物质;

标本采集:禁欲 3-5 天,采集后保温送检(<1h);

精液量 2-6ml,平均 3.5ml;
异常:<1ml 或>8ml;

>1h 不液化:精液迟缓液化症;

PH 7.2-7.8;

无精或射精量<1ml患者,有果糖:射精管阻塞;
无果糖:精囊阻塞;

LDH 同工酶(LD-X)测定:电泳在 LD3-LD4;活性≥43%;

活动率 >60%;
存活率 ≥58%;

活动力 四级:a(快速向前,3 级);
b(缓慢,2 级);
c(原地,1 级);
d(不动,0 级);

精子计数 ≥15 ×109/L;

41、前列腺液检查 PH 弱酸性;
pH6.3-6.5;

RBC:偶见 RBC(<5/HP);
WBC:<10/HP;

WBC>10-15/H,前列腺炎;

42、阴道分泌物检查 血性白带:宫颈癌、使用宫内节育器、宫颈息肉等;

脓性白带:慢性宫颈炎、子宫内膜炎、老年性阴道炎;

黄色泡沫:滴虫性阴道炎;

豆腐渣样:真菌性阴道炎;
85%为白假丝酵母菌 pH 4-4.5;

淋球菌:WHO推荐的唯一方法是培养法 43、羊水检查 肺成熟度 泡沫试验(双试管法):
.(卵磷脂/鞘磷脂)L/S≥2:胎儿肺部发育成熟 . L/S=1.5-1.9:不够成熟;

. L/S<1:肺不成熟,已发生 IRDS;

肾成熟度 羊水中:34-36周crea≥132.4μmol/L,足月≥176.6;

肝成熟度 羊水胆红素<1.71 µmol/L—肝成熟;

神经管缺陷:AFP测定;

44、痰液与支气管灌洗液检验 理学检查:清晨第一口痰,血腥味见于肺癌、肺结核;

细胞学:9-10am;
结核杆菌:12-24h 痰;
24小时痰量、分层:苯酚防腐;

夏科-莱登结晶:支气管哮喘(过敏性,同夏科雷登结晶);

胆固醇结晶:肺脓肿、脓胸、肺结核、肺肿瘤;

胆红素结晶:肺脓肿;

45、胃液检验 正常:1.2-1.5L,无色透明,少量粘液,略带酸味,空腹12h胃内无食物残渣;
PH 0.9-1.8;
正常分两层(上—粘液,下—胃液);

BAO/MAO>0.6:胃泌素瘤;

46、脱落细胞学检验 脱落上皮细胞退化变性;

内底层细胞核质比1:(0.5-1);
外底层细胞核质比1:(1-2);
中层细胞核质比:1:(2-3);
表层细胞核质比1:(3-5);
不完全角化细胞核质比:1:5;

底、中层细胞—肿胀性变性;

柱状上皮细胞—肿胀性变性;

五级分级法 1 级:一般炎症细胞;

2 级:轻度核异质,无恶变;

3 级:重度核异质,不能肯定为恶性;

4 级:大量重度核异质,提示为恶性肿瘤;

5 级:典型癌细胞;

宫颈鳞状上皮癌:低分化鳞癌(最常见);

肺癌:胸水最常见的恶性肿瘤;

乳腺癌:女性胸水最常见的恶性肿瘤;

腺癌 1. 支气管腺癌:分化好(成群脱落为主,细胞群大,重叠立体结构);
分化差(单个癌细胞增多,细胞小,松散);

凝血 血管壁止血功能:收缩、血小板的激活、凝血系统激活(Ⅻ因子,激活内源凝血系统;
组织因子III,激活外源凝血系统)。局部血粘稠度增高、抗纤溶系统;

血小板上有钠泵和钙泵。细胞器主要有:α颗粒,致密颗粒,溶酶体颗粒。

TXA2是腺苷酸环化酶的重要抑制剂,促进血管收缩。PGI2是TXA2的兴奋剂,阿司匹林抑制PGL2,从而抑制TXA2,抑制血小板聚集。

血小板止血功能:粘附(vWF、GPIb/Ⅸ、GPⅠa/Ⅱa)、聚集(GPⅡb/Ⅲa)、释放、促凝、血块收缩、维护血管内皮完整性 因子 l: 纤维蛋白原;
因子 II:凝血酶原;
因子 III: 组织因子;
因子 IV: 钙因子(Ca2+) 维生素K依赖:FⅡ,FⅦ,FⅨ,FⅩ。

接触凝血因子:FⅫ,FⅪ,PK(激肽释放酶原)。

对凝血酶敏感的凝血因子:FⅠ,FⅤ,FⅧ,FXIII。

内源凝血途径:FⅫ激活 ,至FⅨa-Ⅷa-Ca-PF3形成,8、9、11、12因子 外源凝血途径:TF释放,至TF-FⅧa-Ca,3、7因子;

共同途径:FⅩ激活,至纤维蛋白形成,1、2、5、10、13因子;

肝素与AT-Ⅲ(抗凝血酶)结合,其复合物能与凝血酶及因子结合,使这些酶失去活性,从而起到抗凝作用。

纤溶系统:
组织型纤溶酶原激活物(t-PA):激活纤溶酶原 尿激酶型纤溶酶原激活物(U-PA):可以直接激活纤溶酶原 纤溶酶原(PLG):PLG由肝脏合成,当血液凝固时,在t-PA或u-PA的作用下,被激活为纤溶酶,促使纤维蛋白溶解。

纤溶酶(PL):降解纤维蛋白和纤维蛋白原;
水解多种凝血因子使纤溶酶原转变为纤溶酶;

纤溶抑制物:纤溶酶原抑制剂(PAI)、α2抗纤溶酶(α2-AP) 纤维蛋白(原)降解机制:PL降解纤维蛋白原产生X片、Y片段及D、E片段。降解纤维蛋白则产生x'、Y'、D-D、E'片段。

出血时间(BT):反应毛细血管与血小板的相互作用,试验前一周停用阿司匹林。

束臂试验,评估血管壁的完整性及脆性 凝血酶原时间(PT),外源系统最常用 升高:外源系统因子及纤维蛋白原减低,肝病、维K缺乏、抗凝物质增加。

活化部分凝血活酶时间(APTT):内源凝血系统 升高:见于凝血因子Ⅷ(能检出因子Ⅷ∶C小于25%的轻型血友病)、Ⅸ、Ⅲ、Ⅻ缺乏症;
肝素治疗;
血循环中有抗凝物质;
血管性血友病(vWF缺陷);
纤溶亢进。

APTT纠正试验:患者+1/4正常血浆(硫酸钡吸附血浆或血清),血浆和吸附血浆能纠正,血清不能,Ⅷ缺乏;
血浆不能,其他两样能,Ⅸ缺乏;
三者不能,病理性循环抗凝物质(狼疮、肝素、Ⅷ抑制剂)。

β-TG和PF4是血小板活化的重要指标 血浆纤维蛋白原含量测定:PT衍生法(浊度)及Clauss法(FIB与血浆凝血时间负相关,受FDP影响) 狼疮抗凝物测定 确证试验:加入血小板溶解物候,APTT延长被纠正 筛选试验(APTT)/确证试验=0.8~1.2 甲苯胺蓝纠正试验:TT延长,加入甲苯胺蓝后,TT缩短(5s)或恢复正常,提示肝素或肝素类增多 FDP(+):纤溶活性亢进 继发性纤溶亢进:D二聚体(阳性)。原发性纤溶亢进:D二聚体(阴性) 过敏性紫癜:毛细血管通透性和脆性增加 遗传性毛细血管扩张症:血管壁遗传性发育不全 特发性血小板减少性紫癜:PLT下降,巨核正常,90%PAIg或PA-C3增高 GPIb缺乏,见于巨大血小板综合征; GPⅡb/Ⅲa缺乏,见于血小板无力症 血友病是Ⅷ,Ⅸ,因子异变 血管性血友病(vWF缺陷) FBG≤0.9g/L低纤维蛋白原血症 FBG≤0.5g/L无纤维蛋白原血症 DIC:3P阳性(假阳性高);
FDP>40ug/L(最敏感指标) APTT监测普通肝素 Xa活性监测低分子肝素 PT是监测口服抗凝剂的首选指标 白血病 M0:急性髓细胞白血病微分化型 原始细胞≥30%,无T、B淋巴系标记,至少表达一种髓系抗原,免疫细胞化学或电镜MPO阳性。

M1:原始粒细胞白血病未分化型 骨髓中原始粒细胞≥90%,早幼粒细胞很少,中幼粒细胞以下阶段不见或罕见POX或SB(+)的原始细胞>3%。  M2:原始粒细胞白血病部分分化型 M2a 骨髓中原始粒细胞30%~90%,单核细胞<20%,早幼粒以下阶段>10%。

M2b 骨髓粒系明显增生,异常原始及早幼粒细胞明显增多,以异常的中性中幼粒细胞增生为主,其胞核常有1~2个大核仁,核质发育显著不平衡,此类细胞>30%。

M3:急性早幼粒细胞白血病 骨髓中以颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主,>30%,其胞核大小不一,胞质中有大小不等的颗粒,可见束状的Auer小体。  M3a:粗颗粒型:嗜苯胺蓝颗粒粗大。  M3b:细颗粒型:嗜苯胺蓝颗粒密集而细小。

M4:急性粒-单核细胞白血病 M4a:以原始及早幼粒细胞增生为主,原、幼单及单核>20%;

M4b:以原、幼单核细胞增生为主,原粒+早幼粒细胞>20%;

M4c:具有粒系又具有单核系特征的原始细胞>30%;

M4Eo:除上述特征外,有颗粒粗大且圆、着色较深的嗜酸性粒细胞,占5%~30%(此类细胞常伴有粗大而多的嗜酸颗粒);

M5:急性单核细胞白血病  M5a:未分化型,骨髓原单核细胞≥80%;
  M5b:部分分化型,骨髓原始和幼稚单核细胞>30%。原始单核细胞<80%,其余为幼单和单核细胞增多;
  M6:急性红白血病 骨髓中红细胞系≥50%,常有形态学异常,红系PAS阳性,原粒细胞(或原单+幼单核细胞)>30%,或血片中原粒或原单细胞>5%,骨髓中原粒(或原幼单核)细胞≥20%。部分病例红系30%~50%,而异常幼红细胞(巨幼样变,双核、多核、核碎裂)>10%也可诊断。

M7:急性巨核细胞白血病 外周血有原巨核(小巨核)细胞;
骨髓中原巨核细胞>30%。

  过氧化酶染色POX M1 M2 M3 阳性或强阳性   M4  M5 弱阳,主要用于急性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病的鉴别;

SB与POX类似;

  酯酶染色CE(氯乙酸AS-D萘酚酯酶、α-醋酸萘酚酯酶、酸性α-醋酸萘酚酯酶、α-丁酸萘酚酯酶) 1、急单时,原始至成熟单核大多为ANAE阳性,且易被NaF抑制;

2、急粒时,白血病细胞多呈阴性或弱阳性,M3呈阳性,但均不被NaF抑制;

3、急粒-单时,部分细胞(单核细胞成份)为阳性反应;

4、急性T淋巴细胞白血病可呈阳性,B淋巴型为阴性;

5、急性巨核细胞白血病可呈阳性,可被NaF抑制;

过碘酸-雪夫(PAS)   1、急粒:阴性或弱阳性;

2、急单:阴性或弱阳性;

3、急淋:阳性(粗颗粒状);

4、急性巨核细胞白血病:阳性(块状);

5、鉴别红白血病与巨幼贫:红白血病:阳性。巨幼贫: 阴性;

6、霍奇金+/-,戈谢+,尼曼-匹克:+/-且空泡中心为阴性反应;

  NAP:100个中性粒中阳性比例 1、PNH与AA:前者下降,后者上升;

2、急粒与急淋:前者下降,后者上升;

3、MDS与慢性再障:前者下降,后者上升;

4、慢粒与类白:前者下降(可降至0),后者上升;

5、细菌感染与病毒感染:前者上升,后者无明显变化;

6、恶组与反应性组织细胞增多:前者下降,后者上升;

  酸性磷酸酶染色 1、戈谢氏+,尼曼-匹克-,多毛细胞白血病+(不被L-酒石酸抑制);

2、T淋巴细胞+,B淋巴细胞 -;

贫血 参考范围 MCV:80-100(fl) MCH:27-34(pg) MCHC:320-360(g/L) 按Hb对贫血进行分级:
轻:大于91(g/L) 中:90-60(g/L) 重:60-31(g/L) 极重:≤30(g/L) 红细胞膜异常 球形红细胞、椭圆形红细胞、口型红细胞增多症 渗透脆性试验:盐水渗透脆性增加;

自身溶血试验:溶血>5%,加入ATP可以减轻溶血;

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH) 初筛试验:蔗糖溶血试验,阳性;

确诊试验:酸化血清溶血试验(ham试验),PNH产生溶血,正常红细胞不溶血;

红细胞酶异常 G-6-PD 缺乏(蚕豆病、急性溶血贫、新生儿高胆红素血症、先天性非球形红细胞性溶血性贫血) 筛查试验 高铁血红蛋白还原试验 :还原率下降;

G-6-PD荧光斑点试验:荧光很弱或无荧光;

确诊试验:G-6-PD活性检测,活性减少;

丙酮酸激酶(PK)缺乏症 筛查试验 PK荧光斑点发:正常荧光20min消失,PK缺乏荧光消失时间大于25min;

 确诊试验:PK活性检测,PK缺乏,活性降低;

血红蛋白异常 珠蛋白合成障碍性贫血(地贫)  靶形红细胞及网织红细胞增多,MCV及MCH下降,HbA2明显增高,HbF正常或轻度增加;

镰状细胞贫血(HbS)  镰变试验阳性,HbS占80%以上,HbF增多2%-15%;

自身免疫性 冷凝集综合症 冷凝集素试验:阳性;

冷凝集素试验:4℃凝集,37℃溶血,支原体肺炎,传单也可能出现,几乎均为IgM抗体;

阵发性冷性血红蛋白尿 冷热熔试验:阳性;

冷热熔试验:冷反应抗体0-4℃与红细胞结合,同时吸附补体,不溶血,升温至37℃,补体激活发生溶血;
  红细胞生成减少 再生障碍性贫血 正细胞正色素贫血,网织红细胞极低。全血细胞减少,中性粒细胞减少明显,淋巴比例相对增多,一般抗贫血治疗无效;

缺铁性贫血 小细胞低色素,血清铁蛋白、血清铁、转铁蛋白饱和度下降,总铁结合力增高 骨髓象:粒红比降低,红系增生,以中晚幼为主,核老浆幼,可见嗜多色性红细胞及嗜点彩红细胞,外铁消失、铁粒幼红细胞<15%;

铁粒幼细胞性贫血 红细胞存在“双形性”,血清铁、血清铁蛋白、转铁饱和度增高,总铁结合力正常或降低;

骨髓象:以中幼红为主,有的巨幼样改变,外铁增加、环形铁粒幼红细胞>15%;

维生素B12或叶酸缺乏:巨幼细胞性贫血 血象:大细胞正色素贫血,粒系5叶>5%或6叶>1%;

骨髓象:三系巨幼样变,早、中、晚巨幼红细胞>10%;

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